細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源基因如DNA，RNA等導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制細(xì)胞基因功能、實(shí)現(xiàn)基因調(diào)控的常規(guī)工具。市場(chǎng)上各種轉(zhuǎn)染試劑琳瑯滿目，各有千秋，然而沒(méi)有任何一種轉(zhuǎn)染試劑可以能夠適用于所有細(xì)胞種類(lèi)、滿足所有實(shí)驗(yàn)需求和目的，成分控認(rèn)為轉(zhuǎn)染試劑的成分及作用機(jī)理對(duì)轉(zhuǎn)染效果及細(xì)胞生理作用影響***，是轉(zhuǎn)染試劑選擇的重要依據(jù)，選試劑時(shí)要留意成分哦。嚴(yán)格來(lái)講，轉(zhuǎn)染的方法可以基于化學(xué)法、物理法（電穿孔、顯微注射等）以及***介導(dǎo)法，沒(méi)有一種方法是放之四海而皆準(zhǔn)。作為成分控的小編，本次主要為大家介紹基于各類(lèi)轉(zhuǎn)染試劑的化學(xué)法轉(zhuǎn)染。.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得：只需簡(jiǎn)單地混...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡(jiǎn)介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類(lèi)多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢(shì)：1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間，只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋?zhuān)倥c質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可)。3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化轉(zhuǎn)染試劑--總有一款你想要的.pei轉(zhuǎn)染試劑作用 簡(jiǎn)介：X-tremeGENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑是一種...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡(jiǎn)介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類(lèi)多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢(shì)：1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間，只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋?zhuān)倥c質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可)。3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化pei轉(zhuǎn)染試劑說(shuō)明書(shū)主要內(nèi)容是什么?上海核酸轉(zhuǎn)染試劑原理轉(zhuǎn)染是將外源核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞的過(guò)程，是細(xì)胞和分子生物...

圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí)，實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。試驗(yàn)采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間，在維持優(yōu)良的細(xì)胞活力的同時(shí)，實(shí)現(xiàn)了p53基因表達(dá)水平的有效敲低.功能多樣簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)方案，易于針對(duì)***的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑，可大幅改善實(shí)驗(yàn)性能，使用微克級(jí)的siRNA即可達(dá)到高達(dá)85%的敲低效果。細(xì)胞轉(zhuǎn)染必備——高效低毒轉(zhuǎn)染試劑.上海動(dòng)物轉(zhuǎn)...

用LipoD293?體外DNA轉(zhuǎn)染試劑（Ver.II）（上圖）和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?（下圖）轉(zhuǎn)染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，細(xì)胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖（左側(cè)）和熒光成像圖（右側(cè)）。對(duì)懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較30毫升的293F細(xì)胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin、Xfect和Fugene6等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá)，用量為L(zhǎng)ipoD293?試劑，20微克，所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA。CycloFect轉(zhuǎn)染試劑...

超級(jí)好用的siRNA和miRNA轉(zhuǎn)染試劑——HiPerFect高效沉默低脫靶：HiPerFect是小RNA轉(zhuǎn)染試劑，這種非脂質(zhì)體的脂質(zhì)分子可以在siRNA低至100pM濃度的條件下轉(zhuǎn)染（推薦濃度是1nM-5nM）。保持高效基因沉默的同時(shí)降低脫靶效應(yīng)，正是這一產(chǎn)品的精髓所在。除了siRNA，HiPerFect還能夠用于miRNA模擬物和***劑的轉(zhuǎn)染，滿足miRNA功能分析的需要。操作簡(jiǎn)單，方便快速：HiperFect轉(zhuǎn)染試劑的方便程度也是***的，甚至***之內(nèi)可以完成再次接種、轉(zhuǎn)染到檢測(cè)結(jié)果！這對(duì)于高通量反應(yīng)簡(jiǎn)直是求之不得的福音：轉(zhuǎn)染前將細(xì)胞按比例接種到24孔培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)基可以是含有***...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡(jiǎn)介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類(lèi)多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢(shì)：1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間，只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋?zhuān)倥c質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可)。3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。上海轉(zhuǎn)染試劑配方LNCap細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代嚴(yán)格由ATCC建議的操作...

基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑，其主要作用原理是與DNA通過(guò)沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物，粘附到細(xì)胞膜表面，借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。pH值，鈣離子濃度，DNA濃度，沉淀時(shí)間，細(xì)胞孵育時(shí)間乃至各組分加入順序都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響，因此實(shí)驗(yàn)條件摸索和優(yōu)化時(shí)間較長(zhǎng)，且重復(fù)性不佳?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽(yáng)離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，DNA并沒(méi)有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合物，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面，經(jīng)過(guò)內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞...

基于陽(yáng)離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑，帶正電的聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用，并通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。其又分為樹(shù)枝狀陽(yáng)離子聚合物和線性陽(yáng)離子聚合物兩類(lèi)，前者細(xì)胞毒性相對(duì)較大，后者細(xì)胞毒性較小，但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細(xì)胞毒性，可謂魚(yú)和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑，不局限于單一成分，混合了不同配方的脂類(lèi)（非脂質(zhì)體）、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的成分，兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細(xì)胞毒性小的優(yōu)勢(shì)，且操作更加簡(jiǎn)單，易于高通量。轉(zhuǎn)染試劑--總有一款你想要的.上海非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑配制 Lipofec...

LNCap細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代嚴(yán)格由ATCC建議的操作步驟進(jìn)行，與pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共轉(zhuǎn)染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293?試劑（左圖）和FugeneHD（右圖）分別按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測(cè)GFP熒光，以此來(lái)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。在血清和***的存在下，HepG2和SaoS-2細(xì)胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達(dá)到95%的細(xì)胞融合。轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，分別通過(guò)Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測(cè)效率。M...

羅氏X-TremeGENE 便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者，升級(jí)版的多組分混合試劑，兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性，在超過(guò)350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗(yàn)證，尤其針對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn)。 兩種試劑對(duì)CHO-K1 細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒，A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖，B和D是明場(chǎng)顯微圖. 與競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品比較，X-tremeGENE HP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性 不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對(duì)四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染，X-tremeGENE HP 試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑 超過(guò)350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗(yàn)證 還有一個(gè)好消息 X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑 ...

產(chǎn)生慢***的比較 通過(guò) LipoD293? 試劑（升級(jí)版）和 Lipofectamine LTX（LTX）試劑將三個(gè) cDNAs 共轉(zhuǎn)染進(jìn) 293T 細(xì)胞。一個(gè) GFP 載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來(lái)測(cè)定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細(xì)胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上圖）和 10 微升（下圖）。 5 天后，細(xì)胞通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞的百分比來(lái)測(cè)定慢***的滴度。由 LipoD293? and LTX 產(chǎn)生的慢***的滴度被量化，分為是 8x10^6 和 3x10^6 tu/m...

Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn)、高效的siRNA輸送解決方案。目前尚無(wú)其他siRNA轉(zhuǎn)染試劑能夠在***的細(xì)胞系中（包括常見(jiàn)細(xì)胞類(lèi)型、干細(xì)胞、原代細(xì)胞以及歷來(lái)難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型）提供如此簡(jiǎn)便、高效的siRNA輸送效果。 高效 可在低siRNA濃度下獲得優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效果 相對(duì)于其他的siRNA轉(zhuǎn)染試劑，Lipofectamine RNAiMAX 轉(zhuǎn)染試劑可以獲得更佳的基因***效果。同在10 nM和1 nM p53 siRNA下，Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率，超過(guò)其他RNAi試劑。 研發(fā)合...

用LipoD293?體外DNA轉(zhuǎn)染試劑（Ver.II）（上圖）和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?（下圖）轉(zhuǎn)染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，細(xì)胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖（左側(cè)）和熒光成像圖（右側(cè)）。對(duì)懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較30毫升的293F細(xì)胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin、Xfect和Fugene6等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá)，用量為L(zhǎng)ipoD293?試劑，20微克，所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA。世界上低價(jià)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑P...

簡(jiǎn)介：X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無(wú)動(dòng)物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類(lèi)真核細(xì)胞(包括昆蟲(chóng)細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。優(yōu)勢(shì)：1.簡(jiǎn)單易用的多組分混合試劑，無(wú)動(dòng)物源性成分，室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率，對(duì)于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑，結(jié)果相關(guān)性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過(guò)X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高...

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系），且隨著傳代的進(jìn)行，具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對(duì)來(lái)說(shuō)，這一類(lèi)細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來(lái)更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。 轉(zhuǎn)染試劑--總有一款你想要的.基因轉(zhuǎn)染試劑供應(yīng)商LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：高轉(zhuǎn)染效率，適用于多種細(xì)胞...

美國(guó)Polysciences公司是一家成立于1961年，致力于特殊技精細(xì)化學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品，單/多聚體等產(chǎn)品的研發(fā)供應(yīng)，所提供的產(chǎn)品服務(wù)于組織學(xué)（顯微技術(shù)）、生物技術(shù)、電子技術(shù)、護(hù)理及制藥工程等多個(gè)領(lǐng)域。起初為電子顯微鏡提供納米級(jí)樣本制備方案，幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域。隨后，開(kāi)拓了在病理（組織研究）應(yīng)用產(chǎn)品，使組織除了石蠟包埋外，還能夠包埋在塑料塊中；開(kāi)發(fā)染料和染色劑，以實(shí)現(xiàn)更好的樣品觀測(cè)方式。與****合作，開(kāi)發(fā)了用于診斷試劑盒應(yīng)的聚合物微球。與美國(guó)國(guó)家**中心合作，開(kāi)發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品，并用于紫杉醇的初步臨床試驗(yàn)。繼而開(kāi)發(fā)出超順磁珠，用于DNA、蛋白質(zhì)和肽的研究。用于siRNA的轉(zhuǎn)染...

胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要??！當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好，沒(méi)有細(xì)微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見(jiàn)的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng)，當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時(shí)導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個(gè)部件缺失，或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時(shí)做陰性對(duì)照的習(xí)慣：建議目的基因載體和陰性對(duì)照GFP載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好，質(zhì)粒間比例得當(dāng)，并且對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證。該試劑可將RNA導(dǎo)入多種細(xì)胞系，包...

簡(jiǎn)介：X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無(wú)動(dòng)物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類(lèi)真核細(xì)胞(包括昆蟲(chóng)細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。優(yōu)勢(shì)：1.簡(jiǎn)單易用的多組分混合試劑，無(wú)動(dòng)物源性成分，室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率，對(duì)于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑，結(jié)果相關(guān)性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過(guò)X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源基因如DNA，RNA等導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制細(xì)胞基因功能、實(shí)現(xiàn)基因調(diào)控的常規(guī)工具。市場(chǎng)上各種轉(zhuǎn)染試劑琳瑯滿目，各有千秋，然而沒(méi)有任何一種轉(zhuǎn)染試劑可以能夠適用于所有細(xì)胞種類(lèi)、滿足所有實(shí)驗(yàn)需求和目的，成分控認(rèn)為轉(zhuǎn)染試劑的成分及作用機(jī)理對(duì)轉(zhuǎn)染效果及細(xì)胞生理作用影響***，是轉(zhuǎn)染試劑選擇的重要依據(jù)，選試劑時(shí)要留意成分哦。嚴(yán)格來(lái)講，轉(zhuǎn)染的方法可以基于化學(xué)法、物理法（電穿孔、顯微注射等）以及***介導(dǎo)法，沒(méi)有一種方法是放之四海而皆準(zhǔn)。作為成分控的小編，本次主要為大家介紹基于各類(lèi)轉(zhuǎn)染試劑的化學(xué)法轉(zhuǎn)染。siRNA脫靶效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡，并引起分析問(wèn)題。...

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系），且隨著傳代的進(jìn)行，具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對(duì)來(lái)說(shuō)，這一類(lèi)細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來(lái)更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。 siRNA脫靶效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡，并引起分析問(wèn)題。懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑配制 在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞（原代大鼠動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞）轉(zhuǎn)染效率的比較 圖片由芝加哥大學(xué)肺和重...

.在多種不同類(lèi)型細(xì)胞中基因敲除效率超過(guò)90%。 高靈活應(yīng)用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。 細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過(guò)程本身介導(dǎo)。 兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無(wú)需換液(如無(wú)血清培養(yǎng)基)。 X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說(shuō)明書(shū)建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過(guò)LightCycler? h-HPRT Housekeeping Gene...

羅氏X-TremeGENE 便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者，升級(jí)版的多組分混合試劑，兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性，在超過(guò)350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗(yàn)證，尤其針對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn)。 兩種試劑對(duì)CHO-K1 細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒，A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖，B和D是明場(chǎng)顯微圖. 與競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品比較，X-tremeGENE HP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性 不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對(duì)四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染，X-tremeGENE HP 試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑 超過(guò)350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗(yàn)證 還有一個(gè)好消息 X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑 ...

X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡(jiǎn)介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類(lèi)多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢(shì)：1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間，只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋?zhuān)倥c質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可)。3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作.包括**常見(jiàn)的DNA，用于基因編輯的siRNA，能夠更快表達(dá)蛋白的mRNA，CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。動(dòng)...

圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應(yīng)的敲低現(xiàn)象。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進(jìn)行注射。隨后分離血清并檢測(cè)FVII蛋白的水平（Biophen顯色檢測(cè)）。持續(xù)敲低能力在單次注射后可觀察到更長(zhǎng)的敲低時(shí)間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應(yīng)。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復(fù)合物后分別以1、0.5、及0.25mg/kg的劑量進(jìn)行注射。在第2、5、9、16、23及30...

基于陽(yáng)離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑，帶正電的聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用，并通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。其又分為樹(shù)枝狀陽(yáng)離子聚合物和線性陽(yáng)離子聚合物兩類(lèi)，前者細(xì)胞毒性相對(duì)較大，后者細(xì)胞毒性較小，但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細(xì)胞毒性，可謂魚(yú)和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑，不局限于單一成分，混合了不同配方的脂類(lèi)（非脂質(zhì)體）、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的成分，兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細(xì)胞毒性小的優(yōu)勢(shì)，且操作更加簡(jiǎn)單，易于高通量。包括常見(jiàn)細(xì)胞類(lèi)型、干細(xì)胞、原代細(xì)胞以及歷來(lái)難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型）提供如此簡(jiǎn)便...

在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞（原代大鼠動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞）轉(zhuǎn)染效率的比較 圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供 制備大鼠的動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用 LipoD293?試劑（左圖）和 Lipofecatmine 2000（L2K, 右圖）分別將 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后，用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測(cè) GFP 熒光，以此來(lái)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。 對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞 LNCap 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較 圖片由羅斯威爾公園**研究所（Roswell Cancer Institu...

.在多種不同類(lèi)型細(xì)胞中基因敲除效率超過(guò)90%。 高靈活應(yīng)用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。 細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過(guò)程本身介導(dǎo)。 兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無(wú)需換液(如無(wú)血清培養(yǎng)基)。 X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說(shuō)明書(shū)建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過(guò)LightCycler? h-HPRT Housekeeping Gene...

美國(guó)Polysciences公司是一家成立于1961年，致力于特殊技精細(xì)化學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品，單/多聚體等產(chǎn)品的研發(fā)供應(yīng)，所提供的產(chǎn)品服務(wù)于組織學(xué)（顯微技術(shù)）、生物技術(shù)、電子技術(shù)、護(hù)理及制藥工程等多個(gè)領(lǐng)域。起初為電子顯微鏡提供納米級(jí)樣本制備方案，幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域。隨后，開(kāi)拓了在病理（組織研究）應(yīng)用產(chǎn)品，使組織除了石蠟包埋外，還能夠包埋在塑料塊中；開(kāi)發(fā)染料和染色劑，以實(shí)現(xiàn)更好的樣品觀測(cè)方式。與****合作，開(kāi)發(fā)了用于診斷試劑盒應(yīng)的聚合物微球。與美國(guó)國(guó)家**中心合作，開(kāi)發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品，并用于紫杉醇的初步臨床試驗(yàn)。繼而開(kāi)發(fā)出超順磁珠，用于DNA、蛋白質(zhì)和肽的研究。一般會(huì)同時(shí)設(shè)置對(duì)照，...

用LipoD293?體外DNA轉(zhuǎn)染試劑（Ver.II）（上圖）和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?（下圖）轉(zhuǎn)染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，細(xì)胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖（左側(cè)）和熒光成像圖（右側(cè)）。對(duì)懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較30毫升的293F細(xì)胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin、Xfect和Fugene6等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá)，用量為L(zhǎng)ipoD293?試劑，20微克，所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA。隨后分離血清并檢測(cè)FVII...