本發(fā)明的目的在于提供一種細(xì)胞凍存液，使凍存培養(yǎng)后的細(xì)胞具有成活率高的優(yōu)點(diǎn)，同時滿足凍存液成分簡單、成本低等要求。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)上述目的。***方面，本發(fā)明提供了一種細(xì)胞凍存液，所述細(xì)胞凍存液的成分如下：將上述組分加入到工業(yè)用水中，用于配置得到細(xì)胞凍存液。該細(xì)胞凍存液采用聯(lián)合滲透性和非滲透性保護(hù)液組合方案，細(xì)胞凍存液在完全凝固之前，滲透到細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度，降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，從而保護(hù)細(xì)胞免受高濃度電解質(zhì)的損傷，同時細(xì)胞內(nèi)水分也不會過分外滲，避免細(xì)胞過分脫水皺縮。第二方面，本發(fā)明提供了一種細(xì)胞凍存液的使用方法，所述方法包括如下步驟：1...

**常用的凍存液通常為胎牛血清中添加10％二甲基亞砜(DMSO)，二甲基亞砜(DMSO)，可以減少冰晶的形成，減輕自由基對細(xì)胞損害，改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性，可以很好地在細(xì)胞凍存過程中保護(hù)細(xì)胞。但近年來，隨著人們對安全無毒的追求，而DMSO對細(xì)胞具有一定的毒性，牛血清存在病原菌污染的可能，所以越來越多不含血清、不含DMSO的安全、有效，凍存液被開發(fā)出來。比如CNA公開的凍存液，包括基本培養(yǎng)基、丙三醇、脯氨酸、四氫甲基嘧啶羧酸和右旋糖酐，具體配制比例如下：基本培養(yǎng)基：丙三醇：四氫甲基嘧啶羧酸＝100：20-50：15-30；基本培養(yǎng)基：脯氨酸：右旋糖酐＝100mL...

細(xì)胞凍存是細(xì)胞保種非常常用的一種辦法，在細(xì)胞凍存中有很多非常關(guān)鍵的因素，其中細(xì)胞凍存液是細(xì)胞凍存**關(guān)鍵的要素之一，是細(xì)胞凍存所必須的物質(zhì)。細(xì)胞凍存的作用不僅*是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存，還可以進(jìn)行售賣、運(yùn)輸?shù)仁马?，所以說選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。無血清細(xì)胞凍存液作為細(xì)胞凍存液的一種，那么無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)點(diǎn)有哪些呢？很多所使用的傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液的成份主要是：新鮮的培養(yǎng)基，其中含有10%的胎牛血清和5-10%的DMSO。凍存的方法：將冷凍管置于4℃條件喜愛10分鐘，接著在-20℃的條件下30分鐘，-80℃的條件下保存16-18個小時（或隔夜保存也可以），**后再液氮的環(huán)境中進(jìn)...

細(xì)胞凍存篇凍存原則細(xì)胞凍存原則為“慢凍”，即讓細(xì)胞在緩慢降溫的條件下逐漸冷凍。如果直接將細(xì)胞懸液放在**溫下快速冷凍，細(xì)胞會受到冷凍損傷而死亡。在凍存液中添加的保護(hù)劑（如DMSO、甘油）和在凍存盒中添加的異丙醇，都起到程序性降溫的作用。DMSO使用注意事項DMSO能夠快速穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞中，延緩溫度下降速度，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而起到保護(hù)細(xì)胞的作用。需注意的是，DMSO溶于培養(yǎng)基時，將釋放大量熱量，所以細(xì)胞凍存液需提前配制，不能直接將DMSO加入含有細(xì)胞的培養(yǎng)基中，避免燙傷細(xì)胞。另外，DMSO屬于致*物質(zhì)，使用時應(yīng)戴好手套，規(guī)范操作。程序凍存液配方程序凍存液成分一般由基礎(chǔ)培養(yǎng)基、...

細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外，還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%．15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點(diǎn)降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細(xì)胞損傷。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開始為-1到-2℃...

在不附加任何保護(hù)劑下直接凍存細(xì)胞時，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等，能引起細(xì)胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護(hù)劑，可使冰點(diǎn)降低。在緩慢的凍結(jié)條件下，能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞。貯存在﹣130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成。細(xì)胞凍存時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，待復(fù)蘇時重新進(jìn)入生長分裂周期。實(shí)驗開始前，將凍存管、15毫升離心管、移液管、移液槍、***頭等放入無菌超凈工作臺，以紫外線照射30分鐘。采用通風(fēng)機(jī)通風(fēng)3分鐘。以75%酒精擦拭操作臺和雙手。準(zhǔn)備好冰盒。將離心機(jī)調(diào)節(jié)至800轉(zhuǎn)，5分鐘。水浴箱調(diào)節(jié)至37...

在細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞凍存是**關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，尤其在細(xì)胞***、細(xì)胞存儲中對細(xì)胞凍存更有特殊要求，下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對細(xì)胞凍存做詳細(xì)介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分，細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存（程序降溫法）與快速凍存（非程序降溫法）。程序降溫凍存技術(shù)要點(diǎn)是慢凍，標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1～-2/℃min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min。之前，常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘--->-20℃60分鐘--->-80℃過夜--->液氮罐。不過，由于步驟較多，間隔時間又長，很容易遺忘。之后，人們也開始使用程序...

在細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞凍存是**關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，尤其在細(xì)胞***、細(xì)胞存儲中對細(xì)胞凍存更有特殊要求，下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對細(xì)胞凍存做詳細(xì)介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分，細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存（程序降溫法）與快速凍存（非程序降溫法）。程序降溫凍存技術(shù)要點(diǎn)是慢凍，標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1～-2/℃min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min。之前，常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘--->-20℃60分鐘--->-80℃過夜--->液氮罐。不過，由于步驟較多，間隔時間又長，很容易遺忘。之后，人們也開始使用程序...

適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞3.無需程序降溫，可直接放置-80℃凍存，操作簡單4.不含血清，**減少細(xì)胞污染5.因不含血清，批次間差異小6.無需液氮，-80℃冰箱長期凍存7.可培養(yǎng)板整板凍存，例如雜交瘤細(xì)胞凍存時可節(jié)省篩選過程溫馨提示：1.化學(xué)組成明確，以DMEM為母液，含有DMSO，不含牛血清或其他蛋白成分。2.獨(dú)特的細(xì)胞保護(hù)配方，在凍存過程中細(xì)胞可直接放入-70℃冰箱，無需繁瑣的程序降溫操作。3.不含牛血清或其他蛋白成分，不引入造成細(xì)胞種子污染的外源因子，如各種牛源病毒和支原體等。4.不含牛血清或其他蛋白成分，同樣適用于無血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。5.不含牛血清或其他蛋白成分，非常適合...

白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞。有人親測10%血清凍存細(xì)胞，結(jié)果證明是可以的，但高血清比例的凍存液更有助于提高細(xì)胞活力，此外嬌貴的細(xì)胞可以適當(dāng)提高凍存液中血清的比例以保證獲得更高的存活率及活力。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。常用的凍存保護(hù)劑為二甲基亞砜（DMSO）和甘油，凍存細(xì)胞時加入保護(hù)劑，一方面可以提高細(xì)胞膜對水的通透性，另一方面使冰點(diǎn)降低，延緩凍結(jié)過程。緩慢凍存細(xì)胞的過程中，加入保護(hù)劑可以使細(xì)胞內(nèi)水分滲出到細(xì)胞外...

用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液，混勻；離心，1000rpm，5min；棄去上清液，加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。注意事項：取錯細(xì)胞：拿錯凍存管。（快快快，匆忙之中，難免出錯，況且－170多度，凍手！）解決：（1）核查記錄冊及凍存管上細(xì)胞的名稱、時間是否一致。（2）拿細(xì)胞時戴手套！2.水浴時間太長：2min還沒融化。（凍存管的壁較厚，隔熱）解決：（1）適當(dāng)提高水浴溫度（37度－40度）。（2）要是冬天，就選用保溫盒。3.冰盒內(nèi)時間太長：復(fù)蘇1h后，還沒有加入新的培養(yǎng)液。（高濃度...

但是顯然已經(jīng)不能適應(yīng)現(xiàn)今細(xì)胞***的應(yīng)用場景。隨著細(xì)胞***以及細(xì)胞儲存產(chǎn)業(yè)發(fā)展，細(xì)胞凍存也面臨從科研應(yīng)用走向產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。凍存要求發(fā)生改變，因為凍存細(xì)胞要進(jìn)行臨床應(yīng)用，所以凍存液成分由原來血清變?yōu)闊o血清，無動物源成分，凍存液中使用的所有原料均應(yīng)符合臨床或藥物需求。隨著細(xì)胞凍存數(shù)量增加，凍存流程簡化也成為必然趨勢，因此無血清非程序降溫凍存液應(yīng)運(yùn)而生。目前針對細(xì)胞***領(lǐng)域，AppliedCell推出一款即用型的無血清細(xì)胞凍存液，這款產(chǎn)品是細(xì)胞凍存研究的革新，主要具有幾大特點(diǎn)，凍存液無血清成分、無需配制直接使用、無需程序降溫盒、不需分步降溫、即用型細(xì)胞凍存液。該款凍存液適用于臍帶、脂肪、骨髓...

在細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞凍存是**關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，尤其在細(xì)胞***、細(xì)胞存儲中對細(xì)胞凍存更有特殊要求，下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對細(xì)胞凍存做詳細(xì)介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分，細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存（程序降溫法）與快速凍存（非程序降溫法）。程序降溫凍存技術(shù)要點(diǎn)是慢凍，標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1～-2/℃min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min。之前，常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘--->-20℃60分鐘--->-80℃過夜--->液氮罐。不過，由于步驟較多，間隔時間又長，很容易遺忘。之后，人們也開始使用程序...

不同細(xì)胞系請參照附表。細(xì)胞系凍存密度備注正常人成纖維細(xì)胞1-3x106cells/mL雜交瘤細(xì)胞1-3x106cells/mL某些hybridoma會因冷凍濃度太高而在解凍24小時后死去。貼壁腫瘤細(xì)胞5-7x106cells/mLHela除外,1～3×106cells/ml即可其他懸浮細(xì)胞5-10x106cells/mL人淋巴細(xì)胞高密度凍存效果好干細(xì)胞類1-2x107cells/mL支持高密度凍存MSC細(xì)胞，為常規(guī)血清凍存液的10倍。2、細(xì)胞凍存過程a）將要凍存的細(xì)胞懸液，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)，計數(shù)后離心，800轉(zhuǎn)，3min即可。b）棄去上清，將4度保存的無血清凍存液緩慢加入離心后的細(xì)胞沉淀中...

隔夜取出凍存管直接放液氮凍存?；蛑苯硬捎贸绦蛐越禍睾懈鼮榉奖恪Ｗ髡撸悍?*研究僧鏈接：zhuanlan./p/來源：知乎著作權(quán)歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán)，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處。1、細(xì)胞活力及濃度細(xì)胞應(yīng)在生長良好、致密度約為80-90％、數(shù)目一般為106-107/ml，活力達(dá)90%以上的狀態(tài)下凍存。細(xì)胞活力差的細(xì)胞在凍存后的成活率很小，因此，一定要在細(xì)胞旺盛分裂時期凍存。2、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)DMSO應(yīng)為試劑級等級，無菌且無色，可以用微米濾膜過濾，或者直接購買無菌產(chǎn)品。以5-10ml小體積分裝，4℃避光保存，勿作多次解凍。使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的...

其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，統(tǒng)稱為含血清細(xì)胞凍存液。含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時（或隔夜），后來才移至液氮罐中進(jìn)行長期的儲存。（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量的死亡。）可見，含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時遇到的問題：1.凍存細(xì)胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液，此步可省略)2.需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步驟繁瑣，耗時耗力3.含血清，細(xì)胞污染(病毒、霉菌和支原體等)...

不含血清及動物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細(xì)胞安全成分明確，批次間差異小既適用于一般細(xì)胞的凍存，也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞的凍存無需程序降溫，可直接放置-80℃冰箱長期凍存，操作簡單可培養(yǎng)板整板凍存，例如雜交瘤細(xì)胞的凍存，省時高效。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長期保存的常用方法，其中細(xì)胞凍存液，作為細(xì)胞凍存時必須使用的一種溶液，不僅更是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存，在細(xì)胞的購買、寄贈、交換和運(yùn)送過程中也起著關(guān)鍵作用，因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、...

重復(fù)2～3次，以去除細(xì)胞懸液中的細(xì)胞碎片；e.加少許pbs液，將沉淀細(xì)胞輕輕吹打均勻；加固定液或低溫保存待用。3)根據(jù)細(xì)胞懸液的體積，按一定比例以穩(wěn)定速率加入細(xì)胞凍存液并充分混勻；4)凍存：將步驟3)中充分混勻的細(xì)胞溶液分裝至凍存管中，并轉(zhuǎn)移至液氮中，進(jìn)行程序性降溫至-80℃并轉(zhuǎn)至液氮中儲存；5)細(xì)胞復(fù)蘇：從液氮系統(tǒng)中取出裝有凍存細(xì)胞樣品，等待1～2min使殘余液氮揮發(fā)之后，迅速放入37℃水浴中，待可見冰塊剛好要消失至黃豆大小體積時，取出細(xì)胞樣品待用。6)計算細(xì)胞存活率推薦地，步驟3)中細(xì)胞懸液體積與細(xì)胞凍存液體積的比例為2～8：1，**推薦地，細(xì)胞懸液體積與細(xì)胞凍存液的體積的比例為4...

適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞3.無需程序降溫，可直接放置-80℃凍存，操作簡單4.不含血清，**減少細(xì)胞污染5.因不含血清，批次間差異小6.無需液氮，-80℃冰箱長期凍存7.可培養(yǎng)板整板凍存，例如雜交瘤細(xì)胞凍存時可節(jié)省篩選過程溫馨提示：1.化學(xué)組成明確，以DMEM為母液，含有DMSO，不含牛血清或其他蛋白成分。2.獨(dú)特的細(xì)胞保護(hù)配方，在凍存過程中細(xì)胞可直接放入-70℃冰箱，無需繁瑣的程序降溫操作。3.不含牛血清或其他蛋白成分，不引入造成細(xì)胞種子污染的外源因子，如各種牛源病毒和支原體等。4.不含牛血清或其他蛋白成分，同樣適用于無血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。5.不含牛血清或其他蛋白成分，非常適合...

正確凍存細(xì)胞并從液氮中復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)中**重要的的技術(shù)方法之一。防止細(xì)胞內(nèi)形成冰晶并**大程度降低細(xì)胞壓力，是凍存過程保持細(xì)胞活力的關(guān)鍵。我們可提供各種各樣的無菌過濾、經(jīng)應(yīng)用測試的冷凍保護(hù)劑，如DMSO和含/不含DMSO的即用型細(xì)胞凍存培養(yǎng)基，可**大程度確保凍存和解凍過程中的細(xì)胞活力。即用型細(xì)胞凍存培養(yǎng)基便捷的細(xì)胞凍存培養(yǎng)基試劑無需滴定DMSO濃度，且可提供不含DMSO的制劑版本。CryoStor?細(xì)胞凍存培養(yǎng)基提供2％、5％和10％濃度選擇，以及不含DMSO的制劑版本CryoSOFree?。pZerve?是一種同時適合含血清培養(yǎng)，或不含二甲基亞砜（DMSO）、胎牛血清或其他動物來源...

白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞。有人親測10%血清凍存細(xì)胞，結(jié)果證明是可以的，但高血清比例的凍存液更有助于提高細(xì)胞活力，此外嬌貴的細(xì)胞可以適當(dāng)提高凍存液中血清的比例以保證獲得更高的存活率及活力。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。常用的凍存保護(hù)劑為二甲基亞砜（DMSO）和甘油，凍存細(xì)胞時加入保護(hù)劑，一方面可以提高細(xì)胞膜對水的通透性，另一方面使冰點(diǎn)降低，延緩凍結(jié)過程。緩慢凍存細(xì)胞的過程中，加入保護(hù)劑可以使細(xì)胞內(nèi)水分滲出到細(xì)胞外...

無蛋白(2)方便：即取即用，無需配制(3)簡潔：無需程序降溫，一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存。(4)高效：可一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存，細(xì)胞復(fù)活率高，活力強(qiáng)。二、組織凍存試劑1.組織保存液產(chǎn)品概述:用于保存、運(yùn)輸和細(xì)胞樣品。所有成分對細(xì)胞組織497c364a-6562-42a8-8dcc-ca害作用，不影響保存細(xì)胞或組織的生理功能。產(chǎn)品特點(diǎn)：(1)保存時間長：組織和細(xì)胞在低溫條件（2-8℃）下可保持形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活性至少72小時，保存和運(yùn)輸?shù)慕M織細(xì)胞可用于單細(xì)胞測序。(2)操作簡單：組織或細(xì)胞樣品浸沒到溶液中即可。(3)成分明確：無血清，無蛋白，安全性高。(4)使用方便：即用即取，無需配制(5)質(zhì)量穩(wěn)定可靠，...

適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞3.無需程序降溫，可直接放置-80℃凍存，操作簡單4.不含血清，**減少細(xì)胞污染5.因不含血清，批次間差異小6.無需液氮，-80℃冰箱長期凍存7.可培養(yǎng)板整板凍存，例如雜交瘤細(xì)胞凍存時可節(jié)省篩選過程溫馨提示：1.化學(xué)組成明確，以DMEM為母液，含有DMSO，不含牛血清或其他蛋白成分。2.獨(dú)特的細(xì)胞保護(hù)配方，在凍存過程中細(xì)胞可直接放入-70℃冰箱，無需繁瑣的程序降溫操作。3.不含牛血清或其他蛋白成分，不引入造成細(xì)胞種子污染的外源因子，如各種牛源病毒和支原體等。4.不含牛血清或其他蛋白成分，同樣適用于無血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。5.不含牛血清或其他蛋白成分，非常適合...

重復(fù)2～3次，以去除細(xì)胞懸液中的細(xì)胞碎片；e.加少許pbs液，將沉淀細(xì)胞輕輕吹打均勻；加固定液或低溫保存待用。3)根據(jù)細(xì)胞懸液的體積，按一定比例以穩(wěn)定速率加入細(xì)胞凍存液并充分混勻；4)凍存：將步驟3)中充分混勻的細(xì)胞溶液分裝至凍存管中，并轉(zhuǎn)移至液氮中，進(jìn)行程序性降溫至-80℃并轉(zhuǎn)至液氮中儲存；5)細(xì)胞復(fù)蘇：從液氮系統(tǒng)中取出裝有凍存細(xì)胞樣品，等待1～2min使殘余液氮揮發(fā)之后，迅速放入37℃水浴中，待可見冰塊剛好要消失至黃豆大小體積時，取出細(xì)胞樣品待用。6)計算細(xì)胞存活率推薦地，步驟3)中細(xì)胞懸液體積與細(xì)胞凍存液體積的比例為2～8：1，**推薦地，細(xì)胞懸液體積與細(xì)胞凍存液的體積的比例為4...

并上下振蕩數(shù)次混勻。備注：為了盡量減少污染，未使用完的細(xì)胞凍存液**好凍回-20℃，反復(fù)凍融不影響使用效果。2.用細(xì)胞消化液將生長良好的細(xì)胞消化成單細(xì)胞，并用細(xì)胞計數(shù)器或血球計數(shù)板計數(shù)細(xì)胞濃度。備注：懸浮細(xì)胞不需要消化但仍需要細(xì)胞計數(shù)，不易消化成單細(xì)胞的各種293細(xì)胞等**好使用含有EDTA的胰酶進(jìn)行消化。3.用低速離心沉淀細(xì)胞，棄去上清。備注：通常2000~3000rpm離心5~10min即可。4.用適量細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞。備注：細(xì)胞濃度可根據(jù)情況調(diào)整為1~5×106/ml，通常為3×106/ml左右。5.按每管1ml分裝到細(xì)胞凍存管中。6.直接放入-70℃冰箱中凍存。備注：無需程序...

產(chǎn)品描述無血清細(xì)胞凍存液【無血清細(xì)胞凍存液用途與描述】1、無血清細(xì)胞凍存液用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲。2、細(xì)胞保藏中心，無血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株的長期保存。3、科研高校，無血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株凍存。4、無血清細(xì)胞凍存液用于醫(yī)院樣本庫細(xì)胞樣本保存。支持高密度凍存MSC細(xì)胞（1-2x107cells/mL），為常規(guī)血清凍存液的10倍。無血清細(xì)胞凍存液，含多種保護(hù)劑成分，一些保護(hù)劑，易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞，同時另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞，但可以在冰晶形成之前，優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子，降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量。我公司無血清細(xì)胞凍存液，為...

并上下振蕩數(shù)次混勻。備注：為了盡量減少污染，未使用完的細(xì)胞凍存液**好凍回-20℃，反復(fù)凍融不影響使用效果。2.用細(xì)胞消化液將生長良好的細(xì)胞消化成單細(xì)胞，并用細(xì)胞計數(shù)器或血球計數(shù)板計數(shù)細(xì)胞濃度。備注：懸浮細(xì)胞不需要消化但仍需要細(xì)胞計數(shù)，不易消化成單細(xì)胞的各種293細(xì)胞等**好使用含有EDTA的胰酶進(jìn)行消化。3.用低速離心沉淀細(xì)胞，棄去上清。備注：通常2000~3000rpm離心5~10min即可。4.用適量細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞。備注：細(xì)胞濃度可根據(jù)情況調(diào)整為1~5×106/ml，通常為3×106/ml左右。5.按每管1ml分裝到細(xì)胞凍存管中。6.直接放入-70℃冰箱中凍存。備注：無需程序...

但是顯然已經(jīng)不能適應(yīng)現(xiàn)今細(xì)胞***的應(yīng)用場景。隨著細(xì)胞***以及細(xì)胞儲存產(chǎn)業(yè)發(fā)展，細(xì)胞凍存也面臨從科研應(yīng)用走向產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。凍存要求發(fā)生改變，因為凍存細(xì)胞要進(jìn)行臨床應(yīng)用，所以凍存液成分由原來血清變?yōu)闊o血清，無動物源成分，凍存液中使用的所有原料均應(yīng)符合臨床或藥物需求。隨著細(xì)胞凍存數(shù)量增加，凍存流程簡化也成為必然趨勢，因此無血清非程序降溫凍存液應(yīng)運(yùn)而生。目前針對細(xì)胞***領(lǐng)域，AppliedCell推出一款即用型的無血清細(xì)胞凍存液，這款產(chǎn)品是細(xì)胞凍存研究的革新，主要具有幾大特點(diǎn)，凍存液無血清成分、無需配制直接使用、無需程序降溫盒、不需分步降溫、即用型細(xì)胞凍存液。該款凍存液適用于臍帶、脂肪、骨髓...

本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域：，尤其涉及一種細(xì)胞凍存液，具體涉及一種用于干細(xì)胞的凍存液。背景技術(shù)：：臍帶血是胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液，通常是廢棄不用的。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn)，臍帶血中含有可以重建人體造血和免疫系統(tǒng)的造血干細(xì)胞，可用于造血干細(xì)胞移植，***80多種疾病。因此，臍帶血已成為造血干細(xì)胞的重要來源，特別是無血緣關(guān)系造血干細(xì)胞的來源。也是一種非常重要的人類生物資源。干細(xì)胞***是將具有不斷自我繁殖能力和多向化潛能的干細(xì)胞在體外培養(yǎng)后，再將其移植入患者受損或缺損組織中，從而實(shí)現(xiàn)對損傷組織的補(bǔ)充和修復(fù)。目前干細(xì)胞采集后，需要加入保存液進(jìn)行冷凍保存，細(xì)胞凍存液是細(xì)...

不同細(xì)胞系請參照附表。細(xì)胞系凍存密度備注正常人成纖維細(xì)胞1-3x106cells/mL雜交瘤細(xì)胞1-3x106cells/mL某些hybridoma會因冷凍濃度太高而在解凍24小時后死去。貼壁腫瘤細(xì)胞5-7x106cells/mLHela除外,1～3×106cells/ml即可其他懸浮細(xì)胞5-10x106cells/mL人淋巴細(xì)胞高密度凍存效果好干細(xì)胞類1-2x107cells/mL支持高密度凍存MSC細(xì)胞，為常規(guī)血清凍存液的10倍。2、細(xì)胞凍存過程a）將要凍存的細(xì)胞懸液，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)，計數(shù)后離心，800轉(zhuǎn)，3min即可。b）棄去上清，將4度保存的無血清凍存液緩慢加入離心后的細(xì)胞沉淀中...