倫敦大學(xué)學(xué)院(UCL)的工藝開發(fā)團(tuán)隊(duì),在細(xì)胞藥物Car-T涉及的慢病毒(Lentivirus,LV)生產(chǎn)過(guò)程中,比較了Benzonase和M-SAN HQ中鹽核酸酶在酶活、酶切時(shí)間、各階段LV的穩(wěn)定性等方面的表現(xiàn),發(fā)現(xiàn)在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶酶...
M-SAN HQ中鹽核酸酶發(fā)揮酶活性的條件比較廣。例如,該酶適宜的鹽濃度(NaCl)范圍是0mM-225mM,能耐受400mM NaCl濃度。適宜反應(yīng)溫度為20℃-37℃,能耐受4℃-40℃。Mg2+濃度大于0.5mM即可,在4-15mM范圍即可表現(xiàn)更高活性。...
有研究發(fā)現(xiàn),桿狀病毒表達(dá)載體體系BEV生產(chǎn)的rAAV發(fā)生了與293生產(chǎn)體系不同的衣殼蛋白翻譯后修飾(post-translationalmodifications,PTMs)。這一差異是否會(huì)影響載體趨向性和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率還需要進(jìn)一步驗(yàn)證。除此之外,桿狀病毒多重inf...
經(jīng)典的慢病毒載體(LV)的生產(chǎn)工藝如下,——三質(zhì)粒系統(tǒng)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系,轉(zhuǎn)染24小時(shí)后LV由轉(zhuǎn)染陽(yáng)性細(xì)胞生產(chǎn)并排出到培養(yǎng)上清液中;收獲上清培養(yǎng)液后,加入核酸酶去除HCD污染,通過(guò)澄清步驟去除大的細(xì)胞碎片等雜質(zhì);下游純化步驟分離LV載體,純化方法包括切...
G0F 抗體在 30 分鐘內(nèi):半乳糖的存在會(huì)影響zhiliao性抗體引發(fā)的效應(yīng)功能,為了研究抗體的作用方式,可能需要徹底去除半乳糖殘留物。Genovis的GalactEXO Immobilized 的 β1-4 半乳糖苷酶活性在曲妥珠單抗上使用 30 分鐘孵育...
宿主細(xì)胞DNA(HCD)殘留以染色質(zhì)形式存在,其中有帶負(fù)電荷的DNA、帶正電荷及疏水區(qū)段的組蛋白,就像膠帶一樣能夠吸附很多物質(zhì),包括各種雜蛋白、色譜填料、目的病毒顆粒。非特異吸附雜蛋白,會(huì)影響蛋白雜質(zhì)(如HCP)等的去除;吸附到色譜填料上,會(huì)降低色譜分離純化效...
在傳統(tǒng)生物技術(shù)行業(yè)(如抗體、疫苗領(lǐng)域)使用的下游純化工藝步驟,已經(jīng)用于慢病毒的大規(guī)模下游處理。主要是基于膜(過(guò)濾/澄清,利用切向流過(guò)濾TFF進(jìn)行濃縮/滲濾,基于膜的色譜)和色譜(離子交換色譜IEC,親和色譜AC,體積排阻色譜SEC)的技術(shù)。這些不同的過(guò)程步驟的...
細(xì)胞基因藥物的基因遞送有病毒及非病毒兩種方式,其中病毒遞送更為常用。在病毒遞送路徑中,腺相關(guān)病毒(AAV)和慢病毒(Lentivirus)是常用的兩種載體;差別是病毒基因組的存在形式,AAV的基因組一般不整合到染色體中,以游離形式存在于染色體之外,且一般會(huì)表達(dá)...
與IdeS不同,在蛋白質(zhì)zhiliao藥物的質(zhì)量控制過(guò)程中,詳細(xì)分析和識(shí)別質(zhì)量屬性非常重要。對(duì)于具有柔性連接子的融合蛋白療法,這包括確認(rèn)連接蛋白的質(zhì)量以及蛋白質(zhì)接頭的質(zhì)量。使用 Genovis的GlySERIAS 的連接子酶切可以通過(guò)分離連接的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域來(lái)幫...
在生物工藝流程中,需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染,而核酸酶作為外源成份,也需要在生產(chǎn)流程中去除。核酸酶去除工藝包括熱滅活法、酶抑制劑、離子交換和親合層析法等。AAV衣殼亞種之間因表面電荷的差異導(dǎo)致不同的的等電點(diǎn),——空衣殼pI在6.3左右,包裝了完整基因...
ArcticZymes廠家對(duì)鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品(Salt Active Nucleases,SANs)的生產(chǎn)及質(zhì)控,在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上,增加了cGMP質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),如microbes、endotoxin、蛋白酶等,符合USP-EP要求。廠...
不同于IdeS,Genovis的FabDELLO 是一種蛋白酶,可在鉸鏈上方的單個(gè)位點(diǎn)消化人 IgG1,在兩小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段,無(wú)需還原條件。該酶對(duì)具有突變鉸鏈區(qū)域的抗體(如 LALA 突變)具有活性,并啟用中級(jí) LC-MS 來(lái)表征具有突...
Genovis提供具有低水平內(nèi)Du素的FabRICATOR(IdeS)凍干酶,用于IgG的鉸鏈以下消化。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個(gè)氨基酸位點(diǎn)的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。FabRICATO...
與PNGase F類似,Genvois的OmniGLYZOR用于攜帶N-和簡(jiǎn)單O-糖的糖蛋白的去糖基化。 OmniGLYZOR 試劑盒包括:OmniGlyZOR 微離心柱;PNGase F 凍干;RapiGest?* SF表面活性劑。除非底物蛋白變性,否則某些...
對(duì)于含包膜的病毒載體,如慢病毒LV、逆轉(zhuǎn)錄病毒RV等,在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中收獲。而M-SAN HQ中鹽核酸酶,作為市場(chǎng)上更適合生理鹽條件的核酸酶,所以,M-SAN HQ成了包膜病毒載體生產(chǎn)的更好選擇。優(yōu)勢(shì)在于:1. M-SAN HQ兼容多種細(xì)胞培養(yǎng)體系,在細(xì)胞培...
ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中鹽核酸酶,2021年推出對(duì)應(yīng)的M-SAN HQ ELISA kit。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測(cè)各種生物制品的中間品、半成品和成品中M-SAN HQ中鹽核酸酶的殘留含量...
Core 1型O-聚糖的水解:O-糖基化不僅難以研究,其自然異質(zhì)性也會(huì)導(dǎo)致其他分析出現(xiàn)問(wèn)題。例如,由于樣品中存在許多不同的糖型,因此對(duì)完整或中等水平的重糖基化蛋白質(zhì)進(jìn)行質(zhì)譜分析可能非常困難。酶法去除N-聚糖的解決方案已經(jīng)存在多年,Genvois的PNGase ...
與IdeS不同,Genovis的FabULOUS(SpeB)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在來(lái)自多個(gè)不同物種和亞類的IgG的鉸鏈區(qū)域消化,產(chǎn)生Fab和Fc片段。人、小鼠、大鼠、山羊和綿羊的IgG被FabULOUS消化,產(chǎn)生Fab和Fc片段。人IgG1的主要消化位點(diǎn)是...
Genovis的OglyZOR 是一種內(nèi)切糖苷酶(O-糖苷酶),可特異性水解天然糖蛋白上的he心 1 O-聚糖。OglyZOR 用于去除 O-糖,用于糖分析、確認(rèn) O-糖的存在和降低樣品的異質(zhì)性。Genovis的OglyZOR 是一種內(nèi)切糖苷酶(內(nèi)切-α-N-...
Genovis的PNGase F(肽 N-糖苷酶 F)是一種糖酰胺酶,可水解多肽天冬酰胺與所有哺乳動(dòng)物天冬酰胺連接復(fù)合物、雜交或高甘露糖寡糖的內(nèi)層 GlcNAc 之間的酰胺鍵。該酶用于MS分析前的樣品制備,以降低蛋白質(zhì)異質(zhì)性并實(shí)現(xiàn)游離的聚糖分析,并研究N-聚糖...
該酶適用于在釋放的聚糖結(jié)構(gòu)上修剪半乳糖,用于外切糖苷酶陣列,或用于生成具有均相 G0/G0F 聚糖譜的抗體。1. 高效β-半乳糖苷酶混合物 – 快速去除末端 β1-3 和 β1-4-連接的半乳糖;2. 有助于在亞基水平上識(shí)別糖基化修飾;3. 可固定在即用型離心...
AAV病毒滴度通常分為物理滴度和infection滴度。物理滴度一般是指基因組滴度或者衣殼滴度。在測(cè)定AAV的含量時(shí),通常采用基因組滴度或者衣殼滴度作為單位,其中基因組滴度為攜帶基因組的AAV的濃度,衣殼滴度為AAV物理顆粒的濃度?;蚪M滴度一般采用qPCR、...
我們測(cè)量了FucosEXO從一組dai表不同鍵的不同寡糖底物中釋放的巖藻糖。FucosEXO可有效釋放α1-2、α1-3和α1-4連接的巖藻糖,對(duì)α1-6連接的巖藻糖殘基沒(méi)有活Genovis的FucosEXO的底物特異性:巖藻糖以不同的鍵存在于N-和O-聚糖上...
OglyZOR 來(lái)源于口腔鏈球菌,在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有 His 標(biāo)簽,分子量為 227 kDa。SialEXO來(lái)源于Akkermansia muciniphila,在大腸桿菌中表達(dá)。SialEXO酶含有His標(biāo)簽,組分的分子量分別為42 kDa和66 k...
為了讓所有實(shí)驗(yàn)室都能同時(shí)快速自動(dòng)消化多種抗體,Genovis的FabRICATORMagIC的設(shè)計(jì)具有靈活性,適用于一系列自動(dòng)化平臺(tái)。我們?cè)赥hermoScientific?KingFisher?純化系統(tǒng)上優(yōu)化了FabRICATORMagIC的工作流程,但它可...
對(duì)Genovis的ImpaRATOR處理的樣品的分析表明,ImpaRATOR很好地消化了所有三種底物并產(chǎn)生了相似的糖肽,但預(yù)期的聚糖種類不同。用ImpaRATOR處理的樣品比其他樣品含有更多的變異,因?yàn)槊糠N肽都檢測(cè)到多種聚糖結(jié)構(gòu)。觀察到的聚糖種類主要是單唾液酸...
當(dāng)你應(yīng)用像肽圖這樣的方法時(shí),你可以從Genovis中級(jí)方法中獲得的信息量就沒(méi)有那么多了。一個(gè)主要的區(qū)別是你不能像在肽水平上那樣將修改定位到單個(gè)氨基酸。然而,中級(jí)分析比肽圖譜具有快速和簡(jiǎn)單的巨大優(yōu)勢(shì),因?yàn)樾枰治龅纳V峰要少得多,數(shù)據(jù)處理任務(wù)要簡(jiǎn)單得多。此外,在...
上海倍篤生物科技有限公司(簡(jiǎn)稱“倍篤生物”),由中國(guó)科學(xué)院及生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界人士,于2018年1月共同創(chuàng)立。公司代理多個(gè)品牌的儀器、試劑及耗材,遵守相關(guān)法規(guī)要求,如cGMP規(guī)范、ISO13485質(zhì)量管理體系認(rèn)證等,致力于為診斷領(lǐng)域如分子診斷及病原微生物檢測(cè)研發(fā)等...
生成攜帶 O-糖的糖肽,該酶可實(shí)現(xiàn) O-糖譜分析、O-糖肽圖譜和位點(diǎn)占用測(cè)定,以及使用 MS 分析的中級(jí)方法。1.可靠O-聚糖特異性蛋白酶 – 消化絲氨酸/蘇氨酸糖基化位點(diǎn)的 N 末端;2.穩(wěn)健的消化,增強(qiáng)復(fù)雜生物制藥的表征;3.高特異性 - 可靠的聚糖位點(diǎn)測(cè)...
Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE)與IdeS酶一樣是特異性蛋白酶。在二維核磁共振波譜 (2D-NMR) 之后,可以通過(guò) HOS 分析在精確的原子水平上評(píng)估 mAb 的關(guān)鍵質(zhì)量屬性。從Genovis的FabALACTICA Im...