基因擴增儀因操作方便、運行速度快、實驗結(jié)果準(zhǔn)確,受到越來越多的分子生物學(xué)研究者青睞。面對各種不同性能的基因擴增儀,又該如何選擇呢?基因擴增儀的選購誤區(qū)誤區(qū)一:儀器通道越多越好隨著基因擴增技術(shù)的成熟運用,多重擴增越來越熱鬧,基因擴增儀也不能幸免。從單通道基因擴增儀發(fā)展到如今各個廠家都推出4通道、5通道甚至6通道基因擴增儀,眼花繚亂的選擇讓人無所適從,就有人一不小心走進了“通道越多越好”的誤區(qū)。在使用有些廠家5通道的基因擴增儀時,為了確保實驗結(jié)果的精確性和準(zhǔn)確性都要在實驗中使用ROX或Referencedye,這些熒光染料都必須單獨使用一個檢測通道。這樣以來,真正能檢測多重PCR熒光信號的有效通道只有4個,而且使用校正染料可能會增加后期的使用成本??紤]多重基因擴增儀的通道數(shù)的時候也應(yīng)該從實驗室實際情況出發(fā),多重基因擴增儀并非人人適用、人人可用,因為它使實驗復(fù)雜化了。誤區(qū)二:基因擴增儀無需梯度功能對于使用染料法的定量PCR反應(yīng),雖然有各種各樣的PCR引物設(shè)計軟件或者經(jīng)驗公式計算熔解溫度(Tm值),但運用的公式不同、引物序列不同,Tm值的差異會很大。引物的熔解溫度決定了退火溫度。而且模版中堿基的組合千變?nèi)f化,對于特殊片斷。 基于聚合酶制造的PCR儀實際就是一個溫控設(shè)備,能在變性溫度,復(fù)性溫度,延伸溫度之間很好地進行控制。力康基因擴增PCR儀銷售廠家
PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction)的簡稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DN段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。其特點是能將微量的DNA大幅增加,是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法,PCR實驗室廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個領(lǐng)域,PCR實驗室主要實驗項目:檢測,乙型肝炎,禽疫病,基因的檢測和診斷,DNA指紋,個體識別,親子鑒定及法醫(yī)物證等等。pcr實驗室設(shè)計建設(shè)中容易出現(xiàn)的問題:1、PCR實驗室的空氣流向必須嚴(yán)格按照試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)空氣壓力逐漸遞減方式進行,防止擴增產(chǎn)物順空氣氣流進入擴增前的區(qū)域。需要嚴(yán)格的通風(fēng)設(shè)計,若通風(fēng)設(shè)計不合理,會使風(fēng)速流向混亂,甚至危害人們健康。2、人流路徑與物流路徑設(shè)計不合理進入實驗室區(qū)域工作人員應(yīng)該按照以下路徑:公共清潔區(qū)——更衣間(更換潔凈服)——緩沖間——污染實驗區(qū)工作人員退出實驗室的路徑為:污染試驗區(qū)——緩沖間——淋浴間。 PCR儀規(guī)格有哪些PCR技術(shù)起初的臨床應(yīng)用就是從檢測鐮狀細胞和β-地中海貧血的基因突變開始的。
原位PCR儀:用于從細胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細胞內(nèi)基因擴增儀稱作原位PCR儀。如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內(nèi)的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細胞中,在細胞的靶DNA所在位置上進行基因擴增。不但可以檢測到靶DNA,又能標(biāo)出靶序列在細胞內(nèi)的位置,對于在分子和細胞水平上研究疾病的發(fā)病機理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實用價值。主要應(yīng)用于臨床、科研。原位PCR儀,主要應(yīng)用于:檢測外源性基因片段,提高檢出率,集中在病毒的檢查上,如HIV、HPV、HBV、CMV等;觀察病原體在體內(nèi)分布規(guī)律;內(nèi)源性基因片段,如人體的單基因病、重組基因、易位的染色體、Ig的mRN段、基因片段等;檢測導(dǎo)入基因;遺傳病基因檢測如β-地中海貧血。實時熒光定量PCR儀:在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng)的PCR儀稱作熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴增。擴增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結(jié)果輸出。把這種PCR儀叫做實時熒光定量PCR儀。
力康深耕醫(yī)療領(lǐng)域三十余年,始終堅持重視科技創(chuàng)新,積極響應(yīng)醫(yī)療領(lǐng)域市場需求,為臨床及科研機構(gòu)系統(tǒng)提供真正實用的高性價比產(chǎn)品和數(shù)字化整體解決方案,不斷地優(yōu)化產(chǎn)品組合,產(chǎn)品線涵蓋OR手術(shù)室系列、重癥麻醉系列、實驗室儀器系列、圍產(chǎn)期產(chǎn)品系列、康復(fù)系列、物聯(lián)網(wǎng)健康檢測系列、家用醫(yī)療系列等。未來,力康將繼續(xù)深耕醫(yī)療器械“智”造領(lǐng)域,匠心鍛造民族品牌,共建“物聯(lián)網(wǎng)智慧醫(yī)療健康”生態(tài)體系。力康智聯(lián),卓享數(shù)字化健康新未來。PCR實驗室又叫“基因擴增實驗室”,根據(jù)規(guī)定需有生物安全柜等防護設(shè)備及熒光定量PCR儀等檢測設(shè)備。
談?wù)剶?shù)字PCR那些事數(shù)字PCR即DigitalPCR(dPCR),它是一種核酸分子定量技術(shù)。相較于qPCR,數(shù)字PCR可讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個數(shù),是對起始樣品的定量。1、PCR之?dāng)?shù)字PCR技術(shù)發(fā)展歷程在定量PCR時,我們常常糾結(jié)一個問題,究竟是相對定量還是定量呢?如今,你無需糾結(jié)了,因為數(shù)字PCR(digitalPCR)來了。盡管這兩種技術(shù)有些類似,都是估計起始樣品中的核酸量,但它們有一個重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線或參照基因來測定核酸量,而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個數(shù),是對起始樣品的定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域:拷貝數(shù)變異、突變檢測、基因相對表達研究(如等位基因不平衡表達)、二代測序結(jié)果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。Nacia數(shù)字PCR2、數(shù)字PCR之dPCR檢測原理數(shù)字PCR即DigitalPCR(dPCR)是這幾年才迅速發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù),雖然出生的晚,但是潛力不小,因為數(shù)字PCR解決了qPCR這么多年懸而未決的問題,那就是不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量并且可以將檢測靈敏度提高至單個核酸分子。那它是怎么做到的呢?這要從它的檢測原理說起。Nacia數(shù)字PCR數(shù)字PCR通過將一個樣本分成幾十到幾萬份,分配到不同的反應(yīng)單元。 熒光定量PCR是近年發(fā)展起來的實時定量檢測特定核酸技術(shù),是核酸探針,熒光共振能量傳遞和PCR技術(shù)的有機結(jié)合.國產(chǎn)實時定量PCR儀近期價格
PCR儀是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復(fù)制。力康基因擴增PCR儀銷售廠家
實驗室各區(qū)功能及主要設(shè)備:1、試劑準(zhǔn)備區(qū):主要進行試劑的制備、分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應(yīng)直接運送至該區(qū),不得經(jīng)過其它區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。本區(qū)主要設(shè)備有天平、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器等。對于氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求。2、樣品制備區(qū):主要進行樣品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應(yīng)管和測定DNA的合成。本區(qū)主要設(shè)備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為正壓,以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。3、擴增區(qū):主要進行DNA擴增。此外,已制備的DNA模板(來自樣品制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進行。本區(qū)主要設(shè)備有:擴增儀、冰箱、離心機、加樣器等。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。4、擴增產(chǎn)物分析區(qū):擴增產(chǎn)物的測定。本區(qū)主要設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機、加樣器和水浴箱等。本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域。力康基因擴增PCR儀銷售廠家
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