力康核酸定量PCR儀銷售廠家

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-11-05

    PCR基因擴(kuò)增法在遺傳性疾病產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用,遺傳病是由于遺傳物變化而引起的機(jī)體某一功能或缺陷或異常所致的疾病,其根本變化在于遺傳物質(zhì)。地中海貧血(Thalassemia)是一種遺傳性慢性溶血性貧血病,是世界上常見(jiàn)且發(fā)病比高的一種單基因遺傳病。在兩廣、貴州、四川等地發(fā)病率較高,在廣西等地高達(dá)15%。地中海貧血是由于基因突變?cè)斐芍榈鞍椎牟黄胶?,使結(jié)構(gòu)正常的肽鏈合成量減少甚至沒(méi)有合成表現(xiàn)為溶血性貧血。接受累基因種類分為α、β、γ等,其中以α、β地貧為常見(jiàn),危害了大。珠蛋白基因簇位于人6號(hào)染色短臂上,有兩個(gè)重復(fù)基因基因位于α1、α2、兩個(gè)α基因及其旁側(cè)序列有很大的同源性,易出現(xiàn)染色體不等交換,導(dǎo)致α基因缺失-α地貧。α地貧基因部分缺失有α1基因部分缺失、α2基因缺失、α1及α2基因同時(shí)缺失及非缺失型地貧??梢詰?yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增α1、α2基因從而檢測(cè)這些基因是否缺失、突變等,從而對(duì)α型地中海貧血作出診斷。β地中海貧血基因缺陷主要表現(xiàn)為基因序列中單一核苷酸的突變,或少數(shù)堿基的缺失、插入,使正常β珠蛋白肽鏈合成減注或缺失。應(yīng)用位點(diǎn)特異性寡核苷探針(Aso)進(jìn)行PCR產(chǎn)物斑點(diǎn)雜交即可對(duì)其作出診斷。 實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù)是近年來(lái)的新型檢測(cè)技術(shù),已成為分子醫(yī)學(xué)/生物學(xué)研究的工具,并在許多領(lǐng)域得到了應(yīng)用.力康核酸定量PCR儀銷售廠家

    1.一般性原則(1)長(zhǎng)度:一般引物互補(bǔ)區(qū)的長(zhǎng)度為16-25bp,引物互補(bǔ)區(qū)的4×(G十C)十2×(A十T)不要沒(méi)有必要大于70,一般也不要低于50(2)G十c含量:好在45%一55%之間,但有時(shí)受模板限制,無(wú)法理想化。但在有幾種選擇時(shí),可以把G十c含量接近50%作為參數(shù)之一(3)堿基分布的隨機(jī)性:應(yīng)避免連續(xù)出現(xiàn)4個(gè)以上的單一堿基。尤其是不應(yīng)在其3’端出現(xiàn)超過(guò)3個(gè)的連續(xù)G或C,否則會(huì)使引物在G十C富集序列區(qū)錯(cuò)誤引發(fā)。(4)引物自身:不能含有很長(zhǎng)的牢固的自身互補(bǔ)序列,尤其是引物3‘端回折形成的發(fā)夾不要一般超過(guò)3堿基,否則會(huì)影響引物與模板的結(jié)合(5)引物之間:兩個(gè)引物之間不應(yīng)有很長(zhǎng)的牢固的互補(bǔ)或同源堿基,尤應(yīng)避免3’端的互補(bǔ)重疊。2.具體原則①引物長(zhǎng)度;特異性一般通過(guò)引物長(zhǎng)度和退火溫度控制。如果PCR的退火溫度設(shè)置在近于引物Tm值(引物/模板雙鏈體的解鏈溫度)幾度的范圍內(nèi),18到24個(gè)堿基的寡核苷酸鏈?zhǔn)怯泻芎玫男蛄刑禺愋缘摹R镌介L(zhǎng),擴(kuò)增退火時(shí)被引發(fā)的模板越少。為優(yōu)化PCR反應(yīng),使用確保溶解溫度不低于54℃的短的引物,可獲得好的效率和特異性??偟膩?lái)說(shuō),好在特異性允許的范圍內(nèi)尋求安全性。每增加一個(gè)核苷酸,引物特異性提高4倍;這樣,大多數(shù)應(yīng)用的短引物長(zhǎng)度為18個(gè)核苷酸。 國(guó)產(chǎn)梯度PCR儀詢問(wèn)報(bào)價(jià)PCR已發(fā)展成為分子生物學(xué)領(lǐng)域的一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)和常規(guī)技術(shù),極大地推動(dòng)了生命科學(xué)各個(gè)領(lǐng)域的發(fā)展。

    微滴),包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(也就是說(shuō)我們所說(shuō)的DNA模板),這是與PCR或qPCR反應(yīng)的區(qū)別,PCR或qPCR只在一個(gè)反應(yīng)體系中進(jìn)行,而數(shù)字PCR在每個(gè)反應(yīng)單元(微滴)中都會(huì)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增結(jié)束后統(tǒng)計(jì)熒光信號(hào)并分析。數(shù)字PCR檢測(cè)其實(shí)離我們?cè)絹?lái)越近,下面我們以幾個(gè)臨床案例研究來(lái)舉例,展示數(shù)字PCR巨大的臨床應(yīng)用前景。1).個(gè)體化診療通過(guò)檢測(cè)T790M位點(diǎn)突變情況,可以更好地評(píng)估一代TKI藥物的療效及耐藥情況并指導(dǎo)第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而,由于qPCR平臺(tái)ARMS檢測(cè)技術(shù)的靈敏度有限,沒(méi)有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準(zhǔn)確的檢測(cè)到T790M突變。這個(gè)時(shí)候dPCR技術(shù)展現(xiàn)出了****的檢測(cè)精度,此外,dPCR定量的優(yōu)勢(shì)也能充分發(fā)揮出來(lái)了,可以監(jiān)控突變含量變化,做到及早發(fā)現(xiàn)耐藥。2.)基因表達(dá)分析伊馬替尼(Imatinib)可以有效幫助很多慢性髓細(xì)胞白血?。–ML)患者延長(zhǎng)生存期,但是臨床上發(fā)現(xiàn),伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物表達(dá)量有很大的關(guān)系。研究人員采用dPCR對(duì)CML患者的BCR-ABL1融合基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果檢測(cè)下限可以達(dá)到,顯示出dPCR在痕量核酸檢測(cè)方面比qPCR具有無(wú)可比擬的優(yōu)勢(shì)[2]。

1988年初,Keohanog改用T4DNA聚合酶進(jìn)行PCR,其擴(kuò)增的DN段很均一,真實(shí)性也較高,只有所期望的一種DN段。但每循環(huán)一次,仍需加入新酶。1988年Saiki等從溫泉中分離的一株水生嗜熱桿菌thermusaquaticus中提取到一種耐熱DNA聚合酶。此酶具有以下特點(diǎn):①耐高溫,在70℃下反應(yīng)2h后其殘留活性大于原來(lái)的90%,在93℃下反應(yīng)2h后其殘留活性是原來(lái)的60%,在95℃下反應(yīng)2h后其殘留活性是原來(lái)的40%。②在熱變性時(shí)不會(huì)被鈍化,不必在每次擴(kuò)增反應(yīng)后再加新酶。③提高了擴(kuò)增片段特異性和擴(kuò)增效率,增加了擴(kuò)增長(zhǎng)度。由于提高了擴(kuò)增的特異性和效率,因而其靈敏性也提高。為與大腸桿菌多聚酶IKlenow片段區(qū)別,將此酶命名為TaqDNA多聚酶TaqDNAPolymerase。此酶的發(fā)現(xiàn)使PCR的被應(yīng)用。 而核酸檢測(cè)方法中,PCR儀無(wú)疑是本次臨床檢測(cè)的關(guān)鍵利器。

    PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈,低溫(經(jīng)常是60°C左右)時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合,再調(diào)溫度至DNA聚合酶適反應(yīng)溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈。PCR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備,能在95℃,55℃,72℃之間很好地進(jìn)行溫度控制。PCR擴(kuò)增儀又稱為PCR基因擴(kuò)增儀、PCR核酸擴(kuò)增儀、聚合酶鏈反應(yīng)核酸擴(kuò)增儀,是利用PCR(Polymerasechainreaction,聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)對(duì)特定DNA擴(kuò)增的一種儀器設(shè)備,被運(yùn)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中,例如用于判斷檢體中是否會(huì)表現(xiàn)某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復(fù)制以及親子鑒定等。 PCR儀是為了解決在體外特異性地?cái)U(kuò)增某個(gè)基因的問(wèn)題,從而滿足對(duì)核酸的體外研究和應(yīng)用。上海PCR儀廠家直銷價(jià)

PCR實(shí)驗(yàn)室在儀器設(shè)備等硬件上要滿足開(kāi)展臨床檢驗(yàn)的條件,包括生物安全柜和PCR儀。力康核酸定量PCR儀銷售廠家

力康X960全自動(dòng)醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)是新推出的實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀,秉承力康品牌一貫的 ,產(chǎn)品具有兩通道和五通道兩種配置選擇,標(biāo)配96孔鍍金模塊,滿足不同應(yīng)用需求。力康X960型全自動(dòng)醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)是特異性靶基因檢測(cè)與定量分析的一體化平臺(tái),將PCR熱循環(huán)儀、熒光檢測(cè)和各種應(yīng)用分析軟件結(jié)合于一體,實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)觀察PCR每一循環(huán)中每個(gè)孔中擴(kuò)增產(chǎn)物情況,無(wú)需凝膠電泳分析,無(wú)需純化PCR產(chǎn)物,無(wú)需進(jìn)行其他任何實(shí)驗(yàn)操作即可快速得到分析結(jié)果。力康核酸定量PCR儀銷售廠家

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