原代肝細胞比較常用的模型是二維模型。在膠原包被的培養(yǎng)板上，原代肝細胞可貼壁培養(yǎng)，同樣高密度培養(yǎng)有助于肝細胞分化狀態(tài)的維持。但原代肝細胞在體外的培養(yǎng)時間較短，人原代肝細胞在體外培養(yǎng)3天內(nèi)可保持乙肝病毒易感性，培養(yǎng)兩周發(fā)生明顯的去分化以及細胞凋亡情況。北京大學鄧宏魁教授發(fā)表在《科學》上的數(shù)據(jù)顯示，通過添加5種小分子化合物抑制原代肝細胞去分化進程，可在體外長期維持肝細胞的分化狀態(tài)，維持時間長達八周。那為什么原代肝細胞在體外容易去分化呢？肝細胞在體外缺乏了肝細胞與肝非實質(zhì)細胞的交流，又或者缺乏了肝臟的三維結(jié)構(gòu)?；谝陨蠁栴}與分析，我在碩士期間開展了肝細胞與肝非實質(zhì)細胞的共培養(yǎng)工作。結(jié)果顯示，通過共培養(yǎng)，原代肝細胞可在體外長期培養(yǎng)，并在鋪板后的72天內(nèi)仍然保持了乙肝病毒的易感性，說明缺乏細胞間交流是原代肝細胞發(fā)生去分化的原因之一。到目前為止，原代肝細胞體外維持四個月的時間記錄仍然沒有被打破。 立沃生物原代肝細胞有著嚴格的體外培養(yǎng)規(guī)范和質(zhì)量監(jiān)測機制，努力讓客戶收到的每一管細胞都放心的。廣州獼猴原代肝細胞提取
原代肝細胞也被多方面應用于嵌合體肝模型當中。通過將正常人原代肝細胞移植到患有嚴重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)的肝特異uPA轉(zhuǎn)基因小鼠中，可以成功地構(gòu)建嵌合體肝。而轉(zhuǎn)基因小鼠的uPA表達能夠促使鼠肝細胞死亡，從而為人原代肝細胞的移植、重建和增殖提供了一個適宜的微環(huán)境。在這種重建的嵌合體肝內(nèi)，人肝細胞占據(jù)了大約75％的比例，并且能夠持續(xù)高水平地表達人血清蛋白。通過使用病人血清和病毒核酸影響這種嵌合體小鼠，研究人員發(fā)現(xiàn)在肝內(nèi)可以檢測到病毒的RNA。然而，病理觀察并未發(fā)現(xiàn)病毒影響所導致的細胞病變。這一發(fā)現(xiàn)為研究病毒影響的機制提供了新的途徑，并為開發(fā)解決病毒影響的新方法提供了新的思路。此外，這項研究還為研究肝細胞移植和重建提供了新的實驗模型。通過將人原代肝細胞移植到轉(zhuǎn)基因小鼠中，研究人員可以更好地研究原代肝細胞的生長、分化和功能，從而為克服肝病提供新的思路和方法。這項研究的結(jié)果具有重要的臨床意義，有望為克服肝病和病毒影響提供新的策略。湛江魚原代肝細胞培養(yǎng)原代肝細胞的研究可以幫助人們了解肝臟的功能和疾病，從而了解肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展，為其攻克提供可能。
原代肝細胞有三種常用的分離方法，每種方法都有對應的原理。原代肝細胞是從動物體內(nèi)分離出來的未經(jīng)過傳代的肝細胞，具有很高的生物學活性和生理功能，是研究肝臟生理和病理的重要材料。目前，分離原代肝細胞的方法有直接剪切法、組織塊消化法和兩步膠原酶灌流法等。其中，兩步膠原酶灌流法是一種比較常用的方法，因為它對肝細胞的損傷作用較小，可以提高肝細胞的產(chǎn)量和活力。 在兩步膠原酶灌流法中，首先需要使用螯合劑來螯合肝臟中的鐵離子，以避免膠原酶的活性受到抑制。然后，將肝臟灌注膠原酶，使其分解膠原纖維，從而釋放出肝細胞。這種方法可以分離出數(shù)量多且活力好的肝細胞，適用于各種動物的肝臟，包括小鼠、大鼠、豬等。 直接剪切法是將肝臟切成小塊，將手術(shù)取得的肝組織切成小塊,直接置于簡單培養(yǎng)液中即可。這種方法簡單易行，但對肝細胞的損傷較大，產(chǎn)量和活力較低。 組織塊消化法是將肝臟切成小塊，然后用胰酶等消化酶消化，分離出肝細胞。這種方法產(chǎn)量較高，但對肝細胞的損傷也較大。 分離原代肝細胞是肝臟生理和病理研究的重要前提。不同的分離方法各有優(yōu)缺點，需要根據(jù)實際情況選擇合適的方法。
原代肝細胞的細胞形態(tài)有許多獨特的形態(tài)特征。原代肝細胞是指從新鮮肝臟組織中分離出來的一種細胞類型，呈多邊形或多角形形狀，大小約為20-30微米。原代肝細胞具有明顯的細胞核和細胞質(zhì)，核小而高亮，細胞核呈圓形或橢圓形，也有雙核情況存在。原代肝細胞的細胞質(zhì)內(nèi)含有豐富的細胞器和細胞骨架，濃稠且顏色較深。此外，原代肝細胞表面具有許多微絨毛和微細突起，這些結(jié)構(gòu)有助于細胞之間的黏附和交流。同時，原代肝細胞具有高度的代謝活性和生物合成能力，能夠合成和分泌多種生物活性物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、hormone、細胞因子等。這些獨特的形態(tài)特征使得原代肝細胞成為研究肝臟生理和病理過程的重要模型細胞。立沃生物的原代肝細胞配套提供液氮運輸服務，以及發(fā)貨細胞的定位跟蹤，全力保護客戶所需細胞品質(zhì)和安全。
原代肝細胞是簡單有效的生物體外模型。相比于其他類型誘導產(chǎn)生的肝臟細胞或是cancer細胞系，原代肝細胞在造模的同時不需要復雜的對細胞進行重編程，以及誘導分化，可以更方便更快速的進行高通量藥理研究。此外和另外兩種方式相比，原代肝細胞能夠更準確的反應體內(nèi)的真實情況，有數(shù)據(jù)表明，原代肝細胞比iPSC誘導產(chǎn)生的肝細胞內(nèi)的堿基取代少數(shù)倍，同時這些細胞還保留了捐獻者的特有特征，是較為理想的研究模型。另一個優(yōu)勢在于，原代肝細胞衍生的Organoid可以提供獨特的肝毒模型，因為原代細胞保留了患者特有的I期II期藥物代謝情況。原代細胞不僅擁有捐贈者特有的生理特性，同時也具備其他兩種肝細胞在應對病原體時的生理反應。貼壁原代肝細胞主要用于肝臟再生研究、肝臟3D打印、肝臟疾病研究、HBV、HCV病毒研究等。湛江大鼠原代肝細胞鑒定
立沃生物同批次的原代肝細胞具有高度的穩(wěn)定性和可重復性，可以為客戶提供穩(wěn)定的實驗結(jié)果。廣州獼猴原代肝細胞提取
原代肝細胞是藥物代謝研究領域非常重要的體外模型。原代肝細胞作為藥物代謝和藥物毒理研究的經(jīng)典模型，在探討藥物在肝中的代謝途徑和藥代動力學的研究中發(fā)揮著重要作用。將苗頭化合物與懸浮原代肝細胞共孵育，不但可對化合物在肝細胞中的代謝穩(wěn)定性進行研究，而且還可得到相對多量的高純度的代謝產(chǎn)物，在研究藥物生物轉(zhuǎn)化特征，尋找藥物可能的代謝物方面具有很大的優(yōu)勢。尤其是當有證據(jù)顯示化合物的生物轉(zhuǎn)化途徑為二相代謝、水解作用或肝微粒體中非特異性蛋白結(jié)合很高、肝微粒體中代謝不明顯的時候，原代肝細胞更為不可替代的體外模型。廣州獼猴原代肝細胞提取