云南胰島素啟動(dòng)子糖尿病細(xì)胞模型

人源胰島 B 細(xì)胞模型對(duì)于與胰島相關(guān)的代謝疾病研究，包括糖尿病、糖尿病炎癥、針對(duì) GLP-1R 的 Exendin-4 等類(lèi)似藥物開(kāi)發(fā)有重要作用。通過(guò)干細(xì)胞誘導(dǎo) B 細(xì)胞產(chǎn)生的胰島 B 細(xì)胞存在純度較低，缺乏成熟胰島 B 細(xì)胞功能等問(wèn)題。通過(guò)捐贈(zèng)組織的胰腺 B 細(xì)胞提取，存在供應(yīng)量較低，明顯批次效應(yīng)，耗時(shí)較長(zhǎng)等問(wèn)題。使用糖尿病動(dòng)物模型進(jìn)行研究會(huì)比糖尿病細(xì)胞模型成本更高昂，周期更長(zhǎng)。Human cell design 構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細(xì)胞模型。通過(guò)多輪次優(yōu)化改良，獲得的功能胰腺B細(xì)胞，無(wú)限接近天然人源胰島B細(xì)胞，其胰島素分泌功能與天然細(xì)胞類(lèi)似，基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗(yàn)證的細(xì)胞均一性達(dá)到90%以上（左圖），在2.8 mM and 11 mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應(yīng)（右圖），對(duì)GLP-1R激動(dòng)劑， Exendin4刺激產(chǎn)生明細(xì)那反饋， 且可實(shí)現(xiàn)批量化生成，實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定供應(yīng)。更多Human Cell Desgin相關(guān)產(chǎn)品信息，歡迎咨詢(xún)AlibioBuy！表達(dá) EndoC-BH5 細(xì)胞的修飾 HLA-A2 引發(fā)特異性 A2 同種異體反應(yīng)性 CD8 T 細(xì)胞。云南胰島素啟動(dòng)子糖尿病細(xì)胞模型

HCD利用人胎兒胰腺組織中的靶向ZhongLiu發(fā)生開(kāi)發(fā)了永生化人β細(xì)胞系，其中使用慢病毒載體整合了兩個(gè)轉(zhuǎn)基因，SV40大T抗原(SV40-LT)和人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)兩種轉(zhuǎn)基因均在β細(xì)胞特異性大鼠胰島素啟動(dòng)子(RIP)的控制下表達(dá)。***代細(xì)胞，名為EndoC-βH1，以組成型方式表達(dá)SV40LT和hTERT，而在第二代EndoC-βH2和EndoC-βH3中，這些轉(zhuǎn)基因可在loxP介導(dǎo)的CRE重組后被切除，位點(diǎn)位于慢病毒骨架的3LTR.EndoC-βH5細(xì)胞是通過(guò)使用表達(dá)可切除的SV40LT和hTERT的慢病毒載體對(duì)人胎兒胰腺進(jìn)行靶向ZhongLiu發(fā)生而獲得的.山東糖尿病細(xì)胞模型中國(guó)區(qū)總代理商糖尿病細(xì)胞模型真實(shí)模擬胰島B細(xì)胞分泌，且分泌性強(qiáng)。

EndoC-βH5細(xì)胞是一種新型人類(lèi)胰腺β細(xì)胞解決方案，可用于開(kāi)發(fā)人類(lèi)糖尿病模型以及藥物篩選和驗(yàn)證平臺(tái)，產(chǎn)生流程為：DNA構(gòu)建，慢病毒載體產(chǎn)生，人胎兒胰腺外植體與pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒載體共轉(zhuǎn)導(dǎo)，移植到SCID小鼠的腎囊下，導(dǎo)致八個(gè)月后形成胰島素瘤，從而獲得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5細(xì)胞分別在Opti-β1和Ulti-b1培養(yǎng)基中的βCoat涂層塑料板上培養(yǎng)。使用胰蛋白酶（0.05%）每7天繁殖一次細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)分析表明所有EndoC-βH5細(xì)胞均呈胰島素陽(yáng)性，并且在絕大多數(shù)細(xì)胞中檢測(cè)到PDX1和NK6.1表達(dá)（分別為92.3%和90%）。EndoC-βH5細(xì)胞在涂層塑料上形成小的貼壁簇.

EndoC-βH5GLTx、EndoC-βH5HLA-A2、EndoC-βH5等細(xì)胞可在體外在葡萄糖劑量刺激下產(chǎn)生正常的胰島素分泌反應(yīng)，對(duì)GLP-1R/GLP-1等胰島素刺激因子產(chǎn)生正常響應(yīng)，可以響應(yīng)細(xì)胞因子刺激，表達(dá)HLA-A2等T細(xì)胞受體，因此可用于糖尿病炎癥相關(guān)等多種藥物開(kāi)發(fā)實(shí)驗(yàn)。EndoC-βH5細(xì)胞可批量穩(wěn)定生產(chǎn)，因此可以進(jìn)行基于siRNA的高通量篩選研究中，用于鑒定出潛在的2型糖尿病藥物靶點(diǎn)。HumanCellDesign(HCD)是專(zhuān)門(mén)從事人源胰島β細(xì)胞系構(gòu)建和開(kāi)發(fā)的公司。人源胰島β細(xì)胞模型構(gòu)建技術(shù)性文章早期發(fā)表于2011年，相關(guān)文章總引用量達(dá)到600+，人源胰島β細(xì)胞模型已經(jīng)被全球200多家生物醫(yī)藥和生命科研機(jī)構(gòu)作為糖尿病細(xì)胞模型使用。HCD具有代表性的細(xì)胞系有EndoC-BH1，EndoC-BH3，EndoC-BH5，GLTxEndoC-BH5，HLA-A2EndoC-BH5等，細(xì)胞系可作為糖尿病細(xì)胞模型和糖尿病替代細(xì)胞zhi liao模型使用。更多關(guān)于HumanCellDesign的產(chǎn)品信息，歡迎咨詢(xún)AlibioBuy。EndoC-BH1細(xì)胞每百萬(wàn)細(xì)胞含有0.48 μg胰島素。

Humancelldesign（HCD）開(kāi)發(fā)了一種用于在人類(lèi)胎兒組織中使用靶向Zhong Liu產(chǎn)生功能的人類(lèi)β細(xì)胞系。在胰島素啟動(dòng)子的控制下，用表達(dá)SV40LT的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)人類(lèi)胎兒胰腺芽。然后將轉(zhuǎn)導(dǎo)的芽移植到SCID小鼠體內(nèi)，使其發(fā)育成成熟的胰腺組織。分化后，新形成的表達(dá)sv40lt的β細(xì)胞增殖并形成胰島素瘤。然后用人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)轉(zhuǎn)導(dǎo)β細(xì)胞，移植到其他SCID小鼠體內(nèi)，在體外擴(kuò)增生成細(xì)胞系。其中一種細(xì)胞系，EndoC-βH1，表達(dá)了許多β細(xì)胞特異性標(biāo)記，而沒(méi)有任何其他胰腺細(xì)胞類(lèi)型標(biāo)記的實(shí)質(zhì)性表達(dá)。在葡萄糖或其他胰島素分泌劑的刺激下，細(xì)胞分泌胰島素，細(xì)胞移植逆轉(zhuǎn)了化學(xué)誘導(dǎo)的小鼠糖尿病。糖尿病細(xì)胞模型可用于糖尿病炎癥研究。天津糖尿病細(xì)胞模型慢病毒載體構(gòu)建方法

在表型上具有和天然胰島素相同的表達(dá)marker。云南胰島素啟動(dòng)子糖尿病細(xì)胞模型

根據(jù)嚙齒動(dòng)物β細(xì)胞獲得的數(shù)據(jù)，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC2A2被認(rèn)為是葡萄糖感知的主要決定因素，而后來(lái)的研究表明，葡萄糖激酶(GLK)是主要決定因素。在人類(lèi)β細(xì)胞中，GLK被認(rèn)為是葡萄糖感知的主要決定因素。為了克服這些限制，在HumanCellDesign中生成了新的β細(xì)胞系。EndoC-βH1是通過(guò)將表達(dá)SV40LT的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)到人類(lèi)胎兒胰腺芽中來(lái)開(kāi)發(fā)的。隨后將轉(zhuǎn)導(dǎo)的芽移植到SCID小鼠體內(nèi)，生成的表達(dá)SV40LT的細(xì)胞增殖并形成胰島素瘤。人源胰島B細(xì)胞模型對(duì)于與胰島相關(guān)的代謝疾病研究，包括糖尿病，糖尿病炎癥，針對(duì)GLP-1R的Exendin4等類(lèi)似藥物開(kāi)發(fā)有重要作用。通過(guò)干細(xì)胞誘導(dǎo)B細(xì)胞產(chǎn)生的胰島B細(xì)胞存在純度較低，缺乏成熟胰島B細(xì)胞功能等問(wèn)題。通過(guò)捐贈(zèng)組織的胰腺B細(xì)胞提取，存在供應(yīng)量較低，明顯批次效應(yīng)，耗時(shí)較長(zhǎng)等問(wèn)題。使用糖尿病動(dòng)物模型進(jìn)行研究會(huì)比糖尿病細(xì)胞模型成本更高昂，周期更長(zhǎng)。更多關(guān)于HumanCellDesign的產(chǎn)品信息，歡迎咨詢(xún)AlibioBuy。云南胰島素啟動(dòng)子糖尿病細(xì)胞模型