宿主細胞殘留DNA是指可能出現于生物制品中由宿主組織細胞產生的DNA片段或更長分子。目前,生物制品常用宿主包括:哺乳動物細胞系中的幼倉鼠腎細胞系、中國倉鼠卵巢細胞(CHO)、非洲綠猴腎細胞(Vero)、小鼠骨髓瘤NS0細胞系、人胚腎細胞系(HEK-293)、酵母菌和大腸桿菌等。重組蛋白藥、抗體藥、疫苗等生物制品由連續(xù)傳代的微生物或動物細胞生產,雖然經過復雜的純化工藝,但產品中仍可能有宿主細胞殘留DNA。殘留的宿主細胞DNA一般有相同的基本結構單位,但存在的長度和形式各異,它們均可導致傳染性、致ai性、免疫原性和突變性等風險;鑒于上述風險,國內外監(jiān)管部門分別出臺了相應的指導原則并提供了宿主細胞殘留DNA檢測的方法。美國FDA對Vero宿主細胞殘留DNA檢測的要求。寧波E.coli殘留DNA檢測價格
E.coli宿主細胞殘留DNA檢測在mRNA藥物生產中的應用。mRNA藥物的制備流程包括模板DNA制備、mRNA原液制備和成品制備,其中DNA原液的制備過程中,需借助大腸桿菌作為宿主細胞擴增質粒DNA,線性化的質粒DNA作為體外轉錄(IVT)的模板,因此,模板DNA中可能有宿主細胞DNA的殘留、mRNA原液可能存在質粒DNA模板的殘留,可能引發(fā)藥物安全性問題。為監(jiān)測生物制品的生產工藝,確保其質量穩(wěn)定性和安全性,國內外監(jiān)管機構建立了生物制品殘留DNA的檢測標準和檢測方法。上海Vero細胞殘留DNA檢測Ecoli宿主細胞殘留DNA檢測的質量控制。
實時熒光定量PCR法宿主細胞殘留DNA檢測的原理和方法:實時熒光定量PCR是基于PCR擴增時,在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,產物的增加可以通過熒光信號指示,通過實時監(jiān)控PCR體系中的熒光信號,對樣本中初始模板進行定量分析。實時熒光定量PCR可實時檢測產物的生成量,通過加入已知濃度的標準樣品繪制標準曲線,然后根據待測樣品在標準曲線中的位置推算初始模板的濃度,從而達到檢測宿主細胞殘留DNA含量的目的。
為什么要做宿主細胞殘留DNA檢測?眾所周知,大部分生物制劑是不經過胃腸道直接進入體內,所以除了生物活性外,相關部門對藥品中雜質的含量要求非常嚴格。其中,宿主細胞殘留DNA因為具有特別的潛在安全風險,一直是監(jiān)管機構關注的重點。生物制品中的重組蛋白藥、抗體藥、疫苗等產品是用連續(xù)傳代的動物細胞株表達生產,雖然經過嚴格的純化工藝,但產品中仍有可能殘余宿主細胞DNA。這些殘余DNA可能帶來傳染性或致瘤性風險,比如殘留DNA可能攜帶HIV病毒或Ras ai基因。
宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒在重組蛋白類醫(yī)療器械領域的應用。已經實施的行業(yè)標準YY/T1888-2023《重組人源化膠原蛋白》中加強了對重組蛋白類醫(yī)療器械的質量控制。重組蛋白類醫(yī)療器械產品是利用基因重組技術,通過工程菌或工程細胞如:E.coli、酵母、CHO細胞等發(fā)酵表達生產目的蛋白。與動物源產品相比減少外源病毒的隱患,同時降低免疫原性的風險。新的行業(yè)標準對于產品中易產生基因毒性及免疫原性的外源性DNA、宿主細胞蛋白、抗生su的殘留量提出了明確的檢測要求。做宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒的公司有哪些?
宿主細胞殘留DNA檢測與重組人源化膠原蛋白行業(yè):①外源性DNA:作為醫(yī)療器械使用的原材料,宜根據預期臨床用途(作為植入物體內使用,還是作為敷料等體表、黏膜使用)、使用量等,確定外源性DNA殘留量限值。如含重組人源化膠原蛋白的產品預期為體內植人劑,推薦參考生物制品外源性DNA殘留限量要求,結合殘留DNA宿主類型及其風險程度設定每人每次最大使用量限值。②宿主細胞蛋白殘留:E.coli、酵母、CHO蛋白質殘留應≤0.05%(體內植人),或≤0.1%(外用)。③殘余抗生su含量:應≤50ng/mg。④微生物限度:如以非無菌的方式提供,每1g.每1mL或每10cm2需氧菌總數應≤102CFU,霉菌和酵母菌菌落數應≤10CFU,不應檢出大腸埃希菌.金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌。宿主細胞殘留DNA檢測定量分析。合肥正揚生物HEK293細胞殘留DNA檢測注意事項
哪些公司有Ecoli宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒?寧波E.coli殘留DNA檢測價格
為什么要做宿主細胞殘留DNA檢測?眾所周知,大部分生物制劑是不經過胃腸道直接進入體內,所以除了生物活性外,相關部門對藥品中雜質的含量要求非常嚴格。其中,宿主細胞殘留DNA因為具有特別的潛在安全風險,一直是監(jiān)管機構關注的重點。生物制品中的重組蛋白藥、抗體藥、疫苗等產品是用連續(xù)傳代的動物細胞株表達生產,雖然經過嚴格的純化工藝,但產品中仍有可能殘余宿主細胞DNA。這些殘余DNA可能帶來傳染性或致瘤性風險,比如殘留DNA可能攜帶HIV病毒或Ras ai基因。寧波E.coli殘留DNA檢測價格