膠原的相對分子質(zhì)量大,電泳圖有3條泳帶,在100kD附近出現(xiàn)的2條泳帶分別是膠原分子的α1鏈和α2鏈,在200kD附近出現(xiàn)的1條泳帶是膠原分子的β鏈。即膠原的每條多肽鏈相對分子質(zhì)量可達100kD,1個膠原分子相對分子質(zhì)量為300kD。多肽分子量的測定方法常用SDS-PAGE,凝膠色譜法以及質(zhì)譜法。有人采用凝膠過濾色譜法測定脫鉻革屑中膠原水解產(chǎn)物分子量分布在。飛行時間質(zhì)譜法測定比目魚皮膠原寡肽分子量的分布主要集中在~。動物蛋白酶水解后的膠原多肽的分子量在2~7kD,比植物蛋白酶水解的膠原多肽分子量范圍更廣。膠原的熱穩(wěn)定性是指測定其在水系中纖維的熱收縮溫度(Ts),或溶液中分子的熱變性溫度(Td)。Ts和Td之差一般在20~25℃,而Ts值較Td值容易測定。Td還可以表示膠原螺旋被破壞的溫度,另外還與其亞氨基酸(脯氨酸和羥脯氨酸)的含量有關(guān),尤其是羥脯氨酸含量,它們之間存在正相關(guān),冷水性魚類的羥脯氨酸含量比較低,所以冷水性魚類膠原蛋白Td值明顯低于暖水性魚類,而又都低于陸生動物。但魚皮膠原蛋白與魚肉膠原蛋白相比,其真皮的Td要比肌肉的低1℃左右,這與肌肉膠原中脯氨酸的羥基化率較真皮膠原高有關(guān)。有人測定了多種魚皮可溶性膠原蛋白的氨基酸組成。采用不同濃度的氯化鈉對提取的膠原蛋白進行鹽析處理,可以沉淀出不同類型的膠原蛋白。黑龍江深海鱈魚膠原蛋白肽
辨別膠原蛋白肽的副作用,***要看原料普通膠原蛋白肽的原料,一般來自于人工飼養(yǎng)豬牛的皮料。飼料中各種不明添加劑和瘋牛病、口蹄疫、禽流感等因素,會導(dǎo)致膠原蛋白存在品質(zhì)問題甚至副作用,無法為媽媽們帶來安全。魚膠原蛋白的原料,一般來自淡水魚,也大部分是飼料喂養(yǎng)的,甚至遭受不干凈的水源污染。普通膠原蛋白,由于原料極易被污染,很有可能存在副作用,損害媽媽人群健康。眾所皆知澳洲與南極之間的海域面積遼闊、深度大。澳洲mmV膠原蛋白肽取自澳洲與南極之間的深海海底的鱈魚皮,比較高距離水面1500米。距離陸地遙遠,完全不受大陸污染。***的產(chǎn)品品質(zhì),時刻呵護媽媽人群健康。北京牡蠣膠原蛋白肽膠原蛋白肽還具有其它許多特殊的生理功能。
鹽法提取是利用各種不同的鹽在不同的濃度條件下提取鹽溶性膠原蛋白的方法。常用來提取膠原的鹽有鹽酸-三羥甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化鈉、檸檬酸鹽等。在中性條件下,當鹽的濃度達到一定量時,膠原就會溶解在其中,但是膠原的溶解和分級受中性鹽效應(yīng)影響,有的鹽可提高膠原的穩(wěn)定性,而有的則可降低其構(gòu)象穩(wěn)定性,從而對提取天然膠原蛋白很不利。此外,可采用不同濃度的氯化鈉對提取的膠原蛋白進行鹽析處理,可以沉淀出不同類型的膠原蛋白。
酸法處理時,反應(yīng)強烈,水解徹底,多生成氨基酸混合物,而且使用酸提取時,根據(jù)酸濃度、水解溫度、水解時間等條件的不同,可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在即使中等濃度酸徹底水解過程中色氨酸也會全部被破壞,絲氨酸和酪氨酸也會部分被破壞,且設(shè)備腐蝕嚴重。因此,酸法溶出生物醫(yī)用膠原要準確控制酸度、溫度、時間等影響因素。由于各種不足,酸法很少單獨使用,一般和酶法配合。比如以豬皮為原料,在檸檬酸()和胃蛋白酶協(xié)同下提取膠原蛋白。在處理后的豬皮中加()處理一段時間,然后再用NaCL鹽析,現(xiàn)在提取率為,提取物保持了完整三股螺旋結(jié)構(gòu)的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料,在,在4℃,20000r條件下離心20min,現(xiàn)在應(yīng)用DEAE-SephadexA-50進行離子交換層析,之后透析,再用NaCL鹽析,現(xiàn)在得到純化的膠原蛋白Ⅱ型。人體的吸收是以肽的方式進行,食用蛋白肽的吸收利用率可達100%。
化學(xué)方法比物理方法改。聯(lián)度高,且能獲得均勻一致的交聯(lián),對調(diào)節(jié)、控制膠原的各性質(zhì)均有效。已廣泛應(yīng)用于各種化學(xué)試劑交聯(lián)膠原,以提高其交聯(lián)度、力學(xué)性能及生物相容性。化學(xué)改性法具體又可分為使用化學(xué)試劑交聯(lián)、側(cè)鏈的修飾、生理活性物的固定化三種方法。[130]化學(xué)試劑交聯(lián)法中常用的化學(xué)交聯(lián)劑有戊二醛、己異二氰酸酯、碳化二亞胺、疊氮二苯基磷等,其中戊二醛是應(yīng)用較比較廣的試劑,大量實驗證明:戊二醛能提供有效交聯(lián),但有細胞毒性,且其用量難以控制。另外,隨著交聯(lián)度的增加,吸水能力和膨脹度卻會降低。?;B氮化物、聚環(huán)氧化物或京尼平交聯(lián)等,不會引入明顯的毒性,且可獲得理想的交聯(lián)效果。所見報道中,多使用單一交聯(lián)劑對膠原蛋白交聯(lián)改性,但也有使用混合交聯(lián)劑的,如為了解決人工心臟瓣膜晚期鈣化問題,篩選出環(huán)氧丙烷化學(xué)改性戊二醛處理生物瓣的方法,可明顯減低瓣膜組織膠原蛋白末端游離羧基含量。動物實驗表明,經(jīng)改性后的瓣膜組織能保持較好的組織穩(wěn)定性和機械抗張強度、免疫原性測試為陰性,符合臨床應(yīng)用。皺紋及細小皺紋的產(chǎn)生與膠原蛋白的自然流失有關(guān),補充膠原蛋白肽后可直接滲透到皮膚真皮層。江西口服膠原蛋白固體飲料
作用營養(yǎng)性、修復(fù)性、保濕性、親和性。黑龍江深海鱈魚膠原蛋白肽
膠原有三種類型的抗原分子:首先類是膠原肽鏈非螺旋的端肽,在天然和變性膠原中均存在。由于2個不同種類的哺乳動物中間的膠原蛋白,其整個氨基酸序列變化不是很大,而且膠原蛋白的三螺旋區(qū)域有高度的進化穩(wěn)定性,但在非螺旋的末端區(qū)域中有很大的變化性,在這區(qū)域中幾乎50%以上的氨基酸殘基表現(xiàn)出種屬性變化,大量的研究和生產(chǎn)都集中在如何完全去除端肽,只要去除端肽就認為是安全的。第二類是膠原的三股螺旋的構(gòu)象,只存在于天然膠原分子中,即位于天然膠原蛋白的三螺旋結(jié)構(gòu)中的抗原決定簇,會在分離和純化過程中暴露出來,尤其是含α1和α2單鏈暴露出的中間端情況下更為明顯。第三類是α-鏈螺旋區(qū)的氨基酸順序,只出現(xiàn)在變性膠原中。黑龍江深海鱈魚膠原蛋白肽
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