如何挑選適合細胞生長的胎牛血清?原代或是正常細胞株建議使用BI特級胎牛血清,對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用特級胎牛血清,或胚胎干細胞胎牛血清。由于血清有批間差異,細胞種類不同,我們建議客戶購買前可先申請試用樣品,通過篩選得到滿意的血清批號,之后根據項目需求可進行批量囤貨,以保證該項目所需血清質量的一致性,可排除不同批號血清對于實驗帶來的影響。如何正確保存胎牛血清?需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請勿超過1個月,若一次無法用完一瓶,建議將血清無菌分裝并冷凍。胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物。杭州優(yōu)等血清哪里有
胎牛血清:胎牛血清參與細胞培養(yǎng),是細胞生長天然的培養(yǎng)基,它為細胞提供生長因子、結合蛋白、脂質、礦物質、黏附和鋪展因子等來促進體外細胞培養(yǎng)。透析胎牛血清主要用于可能需要關注小分子濃度的特殊研究。這主要包括四個領域:蛋白質組學、同位素標記、細胞通訊以及報告基因細胞系的篩選,其中有些領域是相互交叉的。以下稍作舉例。將13C或15N標記的氨基酸摻入到培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞,來標記細胞內新合成的蛋白質,一般培養(yǎng)5-6代,細胞中的蛋白質將都被同位素標記。然后質譜分析,即可比較經過不同處理的細胞,其內部蛋白質豐度的變化。南通標準胎牛血清胎牛血清含有一些小分子物質,如氨基酸、糖類、脂類及Hormone類物質。
胎牛血清融化:胎牛血清在融化過程中,瓶子里冰塊的底部你會看見亮亮的蛋白絲在下沉,如同蜂蜜溶于水時的亮線,這就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔點高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。(回想一下高級冰淇淋和大棒冰的區(qū)別,你懂得?。┰囅耄绻捎?℃過夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大約需要10小時左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此時就很容易有一些蛋白飽和析出,(大多是脂蛋白和纖連蛋白),這就是血清融化中產生沉淀的重要原因之一。
胎牛血清:在細胞培養(yǎng)過程,質量粗糙的FBS可能會導致細胞出現生長速度緩慢、不貼壁、容易老化等現象,從而導致實驗受阻。經過質量驗證的FBS,則可以十分確定這款FBS對哪些細胞具有良好的培養(yǎng)效果,進而判斷其能否把自己的細胞養(yǎng)好。對于質量好的FBS,通常采用血清敏感性細胞(如干細胞)來進行培養(yǎng)驗證,若培養(yǎng)效果良好,則其他常規(guī)細胞系的培養(yǎng)就更不在話下。FBS作為其他行業(yè)的副產品,其生產在本質上會受到天氣、食物供應、經濟條件和牛群規(guī)模等各種因素的影響,導致血清的供應可能出現貨源、價格及批次間的不穩(wěn)定性,從而造成實驗的不順甚至實驗失敗。在過去,國內外已有多個實驗室出現過因血清批間差異大而導致實驗結果無法重復的情況,浪費了巨大的時間和金錢成本。胎牛血清基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
胎牛血清的功能:胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數生長的Hormone,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結合或調變它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到釋放毒性作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。無錫細胞培養(yǎng)用血清廠家
血清對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶。杭州優(yōu)等血清哪里有
用于體外細胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法:包括以下步驟:采集懷孕母牛的胎牛血液獲得血漿,具體步驟如下:采用含有體積含量4-6%葡萄糖的注射液、含有質量含量0.2-0.6%檸檬酸鈉的水溶液進行混合,將上述兩者混合后的混合液A置入取血容器內充分滋潤容器內壁;將胎牛血液置入上述滋潤過的取血容器內,搖動使其與胎牛血液均勻混合;將混合均勻的含有胎牛血液的混合液B置入采的血試管,保持血液在40℃以下恒溫狀態(tài),然后將采的血試管在離心機中以3000-14000r/min轉速旋轉5-30分鐘,分離出血漿、血小板、血球,將所得血漿、血小板、血球分別采用采的血試管分離存放;杭州優(yōu)等血清哪里有
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