冷凍電子顯微鏡技術具有研究對象普遍、樣品需求量少、更接近生理狀態(tài)等獨特優(yōu)勢，隨著電子顯微鏡的硬件設備和結構解析的軟件算法等方面不斷取得的重要突破，冷凍電鏡技術必將在研究對象、分辨率水平和研究方法等各個方面取得重大進展。當然，冷凍電鏡技術也面臨著許多技術上的挑戰(zhàn)...

冷凍電鏡技術揭示生物分子細節(jié)：科學家在透射電子顯微鏡之上發(fā)明了冷凍電鏡，實現(xiàn)了生物分子“近原子級”的分辨率，讓人類終于可以一窺究竟生物分子是如何執(zhí)行其功能。在過去幾年里，冷凍電子顯微鏡技術逐漸成為結構生物學的重要研究工具。冷凍電鏡技術的基本原理是將生物大分子溶...

為了避免血液凝固，通常會在容器中加入抗凝劑，如肝素或乙二酰胺。采集到的血液需要經(jīng)過一系列的處理步驟來制備胎牛血清。首先，將血液進行離心，以分離血漿和紅細胞。離心的速度和時間需要根據(jù)實際情況進行調(diào)整，以確保血漿中的細胞和細胞碎片被完全去除。接下來，將血漿進行過濾...

胎牛血清的純度可以通過生物學活性測定來確定。胎牛血清中的主要活性成分是胎牛血清中的生長因子和細胞因子等物質(zhì)。通過測定這些活性成分的活性水平，可以判斷胎牛血清的純度。生物學活性測定具有直觀、快速的優(yōu)點，可以在較短的時間內(nèi)得到結果。然而，生物學活性測定受到許多因素...

胎牛血清（FetalBovineSerum，F(xiàn)BS）是一種常用的細胞培養(yǎng)基中的重要成分。然而，近年來有關胎牛血清是否會引起免疫反應的討論日益增多。這里將探討胎牛血清引起免疫反應的可能性，并對相關研究進行綜述。胎牛血清是從胎牛胎兒提取的血液，在細胞培養(yǎng)中被普遍應...

胎牛血清：胎牛血清(FBS)，胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量...

胎牛血清是一種常用的細胞培養(yǎng)基添加劑，普遍應用于生物醫(yī)學研究和生物制藥領域。胎牛血清的用量對實驗結果有著重要的影響。這里將探討胎牛血清用量對實驗結果的影響，并提出一些建議以優(yōu)化實驗設計。胎牛血清是從胎牛胎兒的臍靜脈或心臟采集的血液經(jīng)離心、過濾和滅菌等處理得到的...

胎牛血清中的成分和含量可能因批次而異。胎牛血清中含有多種生物活性物質(zhì)，如生長因子、激的素和細胞黏附蛋白等，這些物質(zhì)對細胞的生長和分化起著重要作用。然而，由于胎牛血清的生產(chǎn)過程中的變異性，不同批次之間這些成分的含量可能存在差異。這可能導致在使用不同批次的胎牛血清...

胎牛血清（FetalBovineSerum，F(xiàn)BS）是一種普遍應用于細胞培養(yǎng)和生物醫(yī)學研究中的重要生物制劑。它是從胎牛胎兒的血液中提取的，含有豐富的生長因子、細胞因子和營養(yǎng)物質(zhì)，能夠提供細胞生長和增殖所需的理想環(huán)境。下面將介紹胎牛血清的制備過程。首先，胎牛血清...

胎牛血清具有抗體和凝血因子等功能性成分。在細胞培養(yǎng)中，胎牛血清能夠提供一定的抵菌和抗病毒作用，保護細胞免受外界微生物的染上。同時，胎牛血清中的凝血因子能夠促進細胞的附著和生長，有助于細胞在培養(yǎng)基上形成單層或多層的細胞群。胎牛血清在細胞研究中的應用非常普遍。細胞...

將經(jīng)過病毒滅活處理的血漿進行凍干或冷凍保存。凍干是將血漿在低溫下迅速冷凍，并通過真空脫水的方式將水分去除，得到干燥的血清粉末。冷凍保存則是將血漿在低溫下保存，通常在-20攝氏度或更低的溫度下。在使用胎牛血清之前，需要將其重新溶解并進行質(zhì)量檢測。質(zhì)量檢測通常包括...

冷凍電鏡技術工作流程：做好前面的工作就需要設定較佳的參數(shù)（比如：欠焦值、放大倍數(shù)和電子劑量等），記錄這些樣品區(qū)域的大量圖像，用手工或半自動程序框取那些離散的分子形成的投影圖。然后就是三維結構搭建。由于電子可能對非常敏感的樣品造成輻射損傷，所以單顆粒冷凍電鏡只能...

單顆粒冷凍電鏡技術二維圖像分析——顆粒圖像的匹配與分類：二維顆粒圖像的分類是獲取三維結構過程的第一步。對二維圖像的分析包括兩部分：顆粒圖像的匹配和顆粒圖像的分類。匹配的過程通常會對顆粒圖像應用一些變換操作，通過關聯(lián)函數(shù)去判斷不同顆粒圖像之間的相似程度。圖像匹配...

冷凍電子顯微技術學解析生物大分子及細胞結構的中心是透射電子顯微鏡成像,包括樣品制備、圖像采集、圖像處理及三維重構等幾個基本步驟。三維重構：數(shù)據(jù)處理的較終目的是為了獲得生物樣品的三維質(zhì)量密度圖，由二維圖像推知三維結構的方法即三維重構。其理論原理是在1968年由D...

冷凍電鏡技術助力快速、高效的新藥研發(fā)：分子生物學興起后，基于靶點的藥物發(fā)現(xiàn)逐漸成為主流新藥研發(fā)模式。通常通過結構生物學方法獲得靶點及靶點-受體相互作用的結合位點。將靶點結構和結合位點作為模型進行虛擬篩選，并通過高通量的方法獲得可能結合的潛在分子，并進一步通過結...

冷凍電子顯微鏡技術步驟之圖像采集：冷凍的樣品通過專門的設備一冷凍輸送器轉移到電鏡的樣品室。在照相之前，必須觀察樣品中的水是否處于玻璃態(tài)，如果不是則應重新制備樣品。由于生物樣品對高能電子的輻射敏感，照相時必須使用較小曝光技術。經(jīng)過透射電子顯微鏡中一系列復雜的過程...

冷凍電鏡技術究竟是什么呢？一直以來，科學家們不斷進行基礎生命科學的探究，探究細胞內(nèi)的生命規(guī)律，為人類健康及其他學科提供借鑒。而分子是生命體中行使功能的較小單元，生命科學研究也逐步發(fā)展到了微觀生物分子的結構與功能研究階段，以期逐步加深對生命過程的認知。充分的基礎...

單顆粒冷凍電鏡技術：生物大分子快速冷凍后，在低溫下利用透射電子顯微鏡對結構均一、分散的全同樣品顆粒進行成像，再經(jīng)圖像處理及重構計算獲得樣品的三維結構。可研究生物大分子在溶液中的結構及構象變化、無需結晶、所需樣品量相對較少，適合于蛋白質(zhì)、病毒等生物大分子及其復合...

單顆粒冷凍電鏡技術二維圖像分析——顆粒圖像的匹配與分類：二維顆粒圖像的分類是獲取三維結構過程的第一步。對二維圖像的分析包括兩部分：顆粒圖像的匹配和顆粒圖像的分類。匹配的過程通常會對顆粒圖像應用一些變換操作，通過關聯(lián)函數(shù)去判斷不同顆粒圖像之間的相似程度。圖像匹配...

冷凍電鏡技術未來之路在何方?除了蛋白等生物大分子外，生物樣品還有很重要的一面是細胞和組織。即使是目前有很多重要的蛋白結構都得到了埃米級別的解析，但由于它們都是純化出來的，已經(jīng)脫離了原來位置，就如同一片樹葉脫離了大樹，研究的再深刻，目前也只是一葉遮目，不要說推測...

冷凍電鏡技術，是用于掃描電鏡的很低溫冷凍制樣及傳輸技術(Cryo-SEM)，可實現(xiàn)直接觀察液體、半液體及對電子束敏感的樣品，如生物、高分子材料等。電鏡觀察：樣品經(jīng)過很低溫冷凍、斷裂、鍍膜制樣（噴金/噴碳）等處理后，通過冷凍傳輸系統(tǒng)放入電鏡內(nèi)的冷臺（溫度可至-1...

冷凍電子顯微鏡技術中單顆粒重構技術：該技術也叫做單顆粒分析，主要適用于結構具有全同性的生物大分子的結構解析，蛋白質(zhì)的分子量通常要求在100KD以上，在顆粒數(shù)目足夠多的情況下，理論上其分辨率可以達到原子水平。該方法的圖像處理和三維重構計算過程如下:從原始的電鏡照...

冷凍電鏡技術中的電子斷層掃描技術與單顆粒分析法的比較：單顆粒分析法：它的優(yōu)點：解析生物大分子的理論分辨率可達原子級；樣品受總輻射值??；對稱顆粒的解析分辨率更高；分子量越大，結果越好；電子斷層掃描技術：優(yōu)點：簡單直接；對樣品的要求較低；常用于對細胞或者生物組織結...

冷凍電子顯微鏡技術：目前使用的幾種主要的結構解析方法包括:電子晶體學單顆粒重構技術和電子斷層掃描重構技術等。電子晶體學：電子晶體學技術利用電子顯微鏡的成像和電子衍射的功能，從生物大分子的二維晶體獲取結構信息，解析其三維結構。生物大分子在空間中有序排列，可以形成...

冷凍電鏡技術原理之電子斷層掃描成像技術：通過在顯微鏡內(nèi)傾轉樣品從而收集樣品多角度的電子顯微圖像并對這些電子顯微圖像根據(jù)傾轉幾何關系進行重構的方法稱為電子斷層掃描成像技術。該方法主要應用于細胞及亞細胞器，以及沒有固定結構的生物大分子復合物(分子量范圍為800kD...

冷凍電子顯微鏡技術步驟之樣品制備：用于冷凍電鏡研究的生物樣品必須非常純凈。生物樣品是在高真空的條件下成像的，所以樣品的制備既要能夠保持本身的結構又能抗脫水、電子輻射。現(xiàn)在普遍采用的方法是通過快速冷凍使含水樣品中的水處于玻璃態(tài)，也就是在親水的支持膜上將含水樣品包...

冷凍電鏡技術揭示生物分子細節(jié)：在透射電子顯微鏡下，高能電子束穿透每一個分子，如同X光穿過人的身體一樣，可以拍攝到分子的形貌和它內(nèi)部的結構信息?？茖W家們利用計算機將樣本里的每一個分子提取出來，把相似的分子予以歸類，然后疊加、平均獲得其內(nèi)部結構更為精細的圖像，由此...

冷凍電子顯微技術學解析生物大分子及細胞結構的中心是透射電子顯微鏡成像,包括樣品制備、圖像采集、圖像處理及三維重構等幾個基本步驟。三維重構：數(shù)據(jù)處理的較終目的是為了獲得生物樣品的三維質(zhì)量密度圖，由二維圖像推知三維結構的方法即三維重構。其理論原理是在1968年由D...

冷凍電子顯微技術主要包括單顆粒冷凍電鏡技術和冷凍電子斷層掃描技術。單顆粒冷凍電鏡技術首先捕獲大量隨機分布的同一種生物樣品的二維圖像，然后通過圖像處理算法解析其三維結構。近年來，隨著冷凍電鏡設備和計算機軟硬件的快速發(fā)展，特別是隨著直接電子探測器在冷凍電鏡中的應用...

單顆粒冷凍電鏡技術的顆粒挑選：接下來需要從原始數(shù)據(jù)中篩選出顆粒投影，也被稱為“顆粒挑選”，顆粒挑選的好壞也將影響所有后續(xù)的分析和處理過程，是一個重要并且繁瑣的步驟。顆粒挑選方式可以分為手動挑選、半自動挑選和完全自動挑選這幾種。在早期的分析中，對于結構的了解還非...