如何區(qū)別真假胎牛血清:外觀,拿到血清,較先接觸的是血清外觀,對于缺少細胞培養(yǎng)經驗的人來說,外觀的判斷尤為重要,顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國的細胞培養(yǎng)用血清標準是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,...
胎牛血清制備:離心,將準備好的瓶放入離心套筒調好平衡后,對稱放入離心機,按1800轉/分鐘離心50分鐘后,放入4℃冷庫備用。抽血清,取出4℃冷庫離心好的瓶,注意輕抬輕放,以免將下層血塊和血清混層。將經過高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接...
胎牛血清融化方法:只要2.5個小時,溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時間,而且較大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。血清融化過程中,蛋白質會比水先融化。冰塊底部亮亮的細絲就是融化中的蛋白,血...
胎牛血清的生產工藝:胎牛血清適合脈沖示蹤實驗(同位素標記研究細胞代謝)適合轉染CHO后的篩選,避免外源小分子對細胞產生干擾。透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎上進行加工的。胎牛血清在無菌條件下要經過0.1微米膜三重過濾,要進行一系列的檢測,包括理化性質檢查(如滲透...
胎牛血清的意義:胎牛血清是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血,豐富的生長發(fā)育因子,胎牛血清非常適合各種細胞的培養(yǎng),胎牛血清是細胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基,胎牛血清起到為細胞提供營養(yǎng)、支持、保護的作用。好的的胎牛血清是讓細胞“快樂成長”的必備營養(yǎng)物,但劣質的胎牛血清...
胎牛血清:胎牛血清初次解凍后,應按單次習慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。若置于4°C的血清,應在一周內用完。為保證細胞培養(yǎng)的較佳效果,血清和培養(yǎng)基的配置,應遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則。配好的培養(yǎng)液,應于一周內用完。血清避免反復凍融,避免在4°C或更高溫度儲...
用于體外細胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法:包括以下步驟:采集懷孕母牛的胎牛血液獲得血漿,具體步驟如下:采用含有體積含量4-6%葡萄糖的注射液、含有質量含量0.2-0.6%檸檬酸鈉的水溶液進行混合,將上述兩者混合后的混合液A置入取血容器內充分滋潤容器內壁;將胎牛血...
胎牛血清:胎牛血清初次解凍后,應按單次習慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。若置于4°C的血清,應在一周內用完。為保證細胞培養(yǎng)的較佳效果,血清和培養(yǎng)基的配置,應遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則。配好的培養(yǎng)液,應于一周內用完。血清避免反復凍融,避免在4°C或更高溫度儲...
胎牛血清有必要做熱滅活嗎?實驗證明,經過正確處理的熱滅活胎牛血清,對于大多數(shù)的細胞而言都是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至可能因為高溫處理影響了血清的質量,從而造成細胞生長速率的降低。經過熱處理的血清,沉淀物的形成...
如果胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),應該如何去除?胎牛血清中的沉淀物出現(xiàn)有很多種原因,但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中,這也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本...
選購胎牛血清:為了保證胎牛血清產品的均一性和穩(wěn)定性,胎牛血清生產需遵循相關規(guī)定進行操作。一般來說,胎牛血清制備需經過以下幾個步驟:采集,離心,分離,無菌過濾,用來制作血清的牛血,是通過采集多頭牛的血液混合而成的,因此,想要在同一批次得到大批量品質穩(wěn)定的血清,獲...
如何挑選好的胎牛血清:好的胎牛血清是實驗的成功的前提是所有實驗人做細胞培養(yǎng)的共識,如何挑選好的胎牛血清,可以從以下幾個方面著手。1.外觀,好的血清應是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說明血清污染或血清...
胎牛血清都有哪些重要的指標:一、內的毒性,內的毒性是革蘭氏陰性菌的細胞壁外壁層上的特有成分。當細菌死亡自溶或粘附在其它細胞時,才表現(xiàn)其毒性。內的毒性直接參與細胞凋亡,血清中內的毒性含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內的毒性含量過高,會直接導致細...
選購胎牛血清:為了保證胎牛血清產品的均一性和穩(wěn)定性,胎牛血清生產需遵循相關規(guī)定進行操作。一般來說,胎牛血清制備需經過以下幾個步驟:采集,離心,分離,無菌過濾,用來制作血清的牛血,是通過采集多頭牛的血液混合而成的,因此,想要在同一批次得到大批量品質穩(wěn)定的血清,獲...
膜片鉗實驗實驗,記錄和分析數(shù)據(jù)準備工作就緒后即可進行實驗操作,數(shù)據(jù)記錄和分析。對電極持續(xù)施加一個1mV、10~50ms的階躍脈沖刺激,電極入水后電阻約4~6MΩ,此時在計算機屏幕顯示框中可看到測試脈沖產生的電流波形。開始時增益不宜設得太高,一般可在1~5mV/...
膜片鉗電生理技術服務的數(shù)據(jù)如何處理:1.內面向外式膜片細胞內外和電極內的溶液均可調控,既能較容易地改變細胞內的離子或物質濃度,又能把酶等直接加于膜的內側面,適宜研究胞內物質對通道活動的影響。但實驗中難以改變膜外側物質,且需浸于低鈣液中。常用于研究依賴細胞內鈣的...
膜片鉗技術是通過微玻管電極(膜片電極或膜片吸管)接觸細胞膜,用千兆歐姆以上的阻抗使之封接,在電學上分隔和電極尖開口處相接的細胞膜的小區(qū)域(膜片)以及其周圍,在此基礎上固定點位,對這膜片上的離子通道的離子電流(pA級)進行監(jiān)測記錄的方法。測量回路的中心部分是使用...
活性炭處理胎牛血清的應用:活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌Hormone相關的細胞研究實驗。同時活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種Hormone和生長因子,減少了影響細胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類固醇類化合物,3x100nm無菌...
血清中絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?1.將冷凍保存的血清取出后,置4℃冰箱靜止過夜;2.待血清融化后,上下顛倒,輕輕混勻,繼續(xù)4℃2-3小時;3.輕輕吸取上層血清,分裝,余底下50ml左右;4.低速離心5分鐘,去掉沉淀。若解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該怎么處...
選購FBS應考慮哪些標準?產品檢測,每款FBS在生產上市之前,必須經過嚴格的質控檢測。質控環(huán)節(jié)必不可少,以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格,而血清產品分析證書(COA)就是FBS質控的重要體現(xiàn)。在COA中,常規(guī)的檢測指標包括內的毒性、總蛋白、細菌、病毒等,另外總...
如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?未拆封的血清,一般情況下應存放于-10℃至-20℃,在產品規(guī)定的效期內均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內,再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使...
胎牛血清FBS的處理方法?胎牛血清FBS一般需要冷凍保存,在-5到-20°C之間,并且可以在2到8°C的溫度下解凍。將血清等分并冷凍在較小的部分(通常為50ml試管)中通常很有用,以避免多次冷凍和解凍循環(huán)。有時,一些FBS等分試樣在冷凍溫度下仍保留在液體中。這...
胎牛血清的作用:胎牛血清提供對維持細胞指數(shù)生長的Hormone,胎牛血清基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。胎牛血清提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,胎牛血清能結合或調變它們所結合的物質活力。有些情況下結合蛋白...
如何區(qū)別真假胎牛血清:免疫球蛋白,國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。其...
如何區(qū)別真假胎牛血清:1、血紅蛋白,標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高,反之,數(shù)值越低。2、pH,國產血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關,這也能用來初步鑒別血清的來源。3、微生物。包括細菌、霉菌、支原體...
胎牛血清:胎牛血清是通過母牛剖腹產胎牛心臟密閉穿刺采的血獲得的新鮮胎牛全血,經自然層析、離心后收集得到去除血細胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體,后經生產使用多級高置流膜過濾技術和三級0.1μm終端微濾方法處理后,常用于細胞培養(yǎng)相關實驗。胎牛血清是細胞培養(yǎng)...
胎牛血清的生產工藝:胎牛血清適合脈沖示蹤實驗(同位素標記研究細胞代謝)適合轉染CHO后的篩選,避免外源小分子對細胞產生干擾。透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎上進行加工的。胎牛血清在無菌條件下要經過0.1微米膜三重過濾,要進行一系列的檢測,包括理化性質檢查(如滲透...
膜片鉗系統(tǒng)有如下應用局限性(1)光能應用于懸浮細胞的紀錄,因此大部分的紀錄對象為化細胞,而對于需要貼壁生長的大多數(shù)正常細胞,現(xiàn)有的自動膜片鉗系統(tǒng)就無法紀錄;(2)在紀錄對象上,目前的膜片鉗系統(tǒng)只能紀錄胞膜形狀平整飽滿的細胞,大部分是工具細胞如化細胞,此類細胞有...
選購FBS應考慮哪些標準?產品檢測,每款FBS在生產上市之前,必須經過嚴格的質控檢測。質控環(huán)節(jié)必不可少,以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格,而血清產品分析證書(COA)就是FBS質控的重要體現(xiàn)。在COA中,常規(guī)的檢測指標包括內的毒性、總蛋白、細菌、病毒等,另外總...
冷凍電子顯微技術主要包括單顆粒冷凍電鏡技術和冷凍電子斷層掃描技術。單顆粒冷凍電鏡技術首先捕獲大量隨機分布的同一種生物樣品的二維圖像,然后通過圖像處理算法解析其三維結構。近年來,隨著冷凍電鏡設備和計算機軟硬件的快速發(fā)展,特別是隨著直接電子探測器在冷凍電鏡中的應用...