為什么要做宿主細胞殘留DNA檢測?眾所周知，大部分生物制劑是不經(jīng)過胃腸道直接進入體內(nèi)，所以除了生物活性外，相關部門對藥品中雜質的含量要求非常嚴格。其中，宿主細胞殘留DNA因為具有特別的潛在安全風險，一直是監(jiān)管機構關注的重點。生物制品中的重組蛋白藥、抗體藥、疫苗...

實時熒光定量PCR法宿主細胞殘留DNA檢測的原理和方法：實時熒光定量PCR是基于PCR擴增時，在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，產(chǎn)物的增加可以通過熒光信號指示，通過實時監(jiān)控PCR體系中的熒光信號，對樣本中初始模板進行定量分析。實時熒光定量PCR...

用qPCR法進行rcAAV復制型腺相關病毒檢測時，出現(xiàn)擴增曲線末尾起跳的原因可能是什么？①陰性質控或無模板對照曲線末尾出現(xiàn)起跳情況，考慮環(huán)境存在污染所致，建議對實驗環(huán)境做好控制，如使用低吸附帶濾芯搶頭和低吸附ep管，保證實驗分區(qū)（樣品處理區(qū)、試劑保存及配制區(qū)、...

在進行支原體檢測之前，對支原體DNA進行提取的目的是為了從樣品中純化和富集支原體的DNA，以便進行后續(xù)的檢測和分析。以下是進行支原體DNA提取的主要原因和目的：去除抑制物質：某些樣品中可能含有對PCR或其他分子檢測方法有抑制作用的物質，如酶抑制劑、有機溶劑等。...

南京正揚生科科技有限公司自主研發(fā)的支原體檢測試劑盒包括支原體DNA提取試劑盒（磁珠法）和支原體DNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法），支原體DNA檢測試劑盒利用Taqman熒光探針原理，定性檢測主細胞庫、工作細胞庫、病毒種子批以及臨床***用細胞中是否有...

實時熒光定量PCR法rcAAV復制型腺相關病毒檢測試劑盒的操作流程包括病毒DNA提取、qPCR試劑配制、qPCR加樣及上機檢測、結果分析四個環(huán)節(jié)。病毒DNA提取包含樣品前處理、樣品裂解液消化、病毒DNA與磁珠結合、一次洗滌、二次洗滌、洗脫；qPCR試劑在配...

南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的宿主細胞殘留DNA提取試劑盒，應用于各種類型生物制品的中間品、半成品、原液、終產(chǎn)品樣本中提取微量的宿主細胞DNA。試劑盒采用特別修飾的氧化硅納米磁性微球在獨特緩沖體系和外加磁場的作用下，可從復雜生物樣本中提取微量DNA并純...

體外培養(yǎng)環(huán)境中，細胞自身沒有抗污染的能力，即使培養(yǎng)基會添加***，抵抗污染的能力也很有限。常見的微生物污染為細菌、***、支原體和病毒等，其中又以支原體污染蕞為普遍棘手。一旦污染了支原體的細胞將無法正常形成單克隆，而且細胞轉染過程容易死亡，細胞實驗...

磁珠法核酸提取過程中的常見誤區(qū)--洗滌次數(shù)越多，洗滌效果越好提取得到的核酸雜質過多時，使用者會考慮多進行幾次洗滌，以得到更為純凈的核酸。增加洗滌次數(shù)確實有利于提純核酸，但考慮到每次洗滌都會損失一定量的核酸，且增加了核酸斷裂水解的可能性，所以一般來說洗滌次數(shù)控制...

目前實驗室常用的支原體檢測方法有培養(yǎng)法、熒光指示細胞法、PCR法、掃描電子顯微鏡法，這些方法各有優(yōu)缺點。PCR法檢測支原體的方法蕞為快速、靈敏、取樣量少，既可做細胞本身，也可做細胞上清的檢測，同時可以檢測多種支原體的污染，是目前常用的檢測手段。PCR法是20世...

裂解效果不好？多加點裂解液。洗滌效果不好？多加點洗滌液。這是大家在使用核酸提取試劑盒時的慣性思維。但是對于磁珠法而言，每增加一部分液體體積，就減少了更多的磁珠碰撞幾率，而降低磁珠碰撞幾率，會導致吸附率的大幅度下降。所以很多時候，雖然增加裂解液和洗滌液確實能夠起...

在進行支原體檢測之前，進行支原體核酸提取的目的是為了從樣品中純化和富集支原體的DNA，以便進行后續(xù)的檢測和分析。支原體是一類細小的細菌樣微生物，其基因組含有DNA。通過對支原體DNA的提取，可以獲得純凈的DNA樣本，有助于準確、敏感地檢測支原體的存在和進行進一...

在進行支原體檢測之前，對支原體DNA進行提取的目的是為了從樣品中純化和富集支原體的DNA，以便進行后續(xù)的檢測和分析。以下是進行支原體DNA提取的主要原因和目的：去除抑制物質：某些樣品中可能含有對PCR或其他分子檢測方法有抑制作用的物質，如酶抑制劑、有機溶劑等。...

隨著**相關信息的傳播，許多先前不為大眾所知的診斷行業(yè)專業(yè)名詞逐漸變得家喻戶曉，如核酸檢測、試劑盒、咽拭子、假陰性等等。我們在進行核酸檢測的時候，通常需要在檢測之前經(jīng)歷核酸提取這一步驟，簡單來說就是將病毒的核酸從我們采集的樣本當中提取出來，以用于后續(xù)實...

用qPCR進行rcAAV復制型腺相關病毒檢測時，哪些因素會對檢測結果準確性和方法靈敏度存在較大影響？前處理過程雜質干擾的去除對qPCR法宿主細胞殘留DNA檢測結果有著較大影響。樣品的前處理操作步驟對DNA檢測結果的準確度影響較大，通常采用加樣回收試驗來進行驗證...

美國藥典USP40〈1223〉對NAT法支原體檢測產(chǎn)品有關性能驗證的要求，包括專屬性、檢測限（LOD）、耐用性、重現(xiàn)性。其中對于定量限（LOD）的定義及驗證方法如下：一種備用微生物方法的檢測限(LOD)定義為在規(guī)定的實驗條件下，在規(guī)定體積的樣品中可以檢測但不一...

qPCR法支原體檢測試劑盒的操作流程包括支原體DNA提取、qPCR試劑配制、qPCR加樣及上機檢測、結果分析四個環(huán)節(jié)。支原體DNA提取包含樣品前處理（離心分離上清等）、樣品裂解液消化、支原體DNA與磁珠結合、一次洗滌、二次洗滌、洗脫；qPCR試劑在配制時需先將...

南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的全自動核酸提取儀的優(yōu)點：①操作簡單：只需2步手工操作；②快速提?。褐恍?6min即可完成樣品微量核酸的提取純化；③精確控溫：提高裂解和洗脫效率，避免系統(tǒng)誤差；④穩(wěn)定可靠：避免人工操作引起的差異及錯誤，結果穩(wěn)定，重復性好；⑤...

南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的宿主細胞殘留核酸提取試劑盒（磁珠法）有哪些操作注意事項？①洗滌液A/洗滌液B在***次使用時需按照試劑瓶上的標識加入指定量的異丙醇；②磁珠懸浮液不可冷凍、高速離心、長時間離心，會導致磁珠與核酸的結合能力下降，導致回...

隨著**相關信息的傳播，許多先前不為大眾所知的診斷行業(yè)專業(yè)名詞逐漸變得家喻戶曉，如核酸檢測、試劑盒、咽拭子、假陰性等等。我們在進行核酸檢測的時候，通常需要在檢測之前經(jīng)歷核酸提取這一步驟，簡單來說就是將病毒的核酸從我們采集的樣本當中提取出來，以用于后續(xù)實...

生物檢測通常用于篩選載體產(chǎn)品中的RCR，而對輸注后患者的監(jiān)測則依賴于分子或血清學檢測。分子和血清學檢測比生物檢測更快，消耗的資源更少；然而，它們也很容易給出誤報。蕞常用的RCR病毒檢測是擴展的S+/L-測定和標記拯救測定。蕞常見的RCL生物測定方法是通過在增殖...

核酸提取時，加標回收率的定義及注意事項：加標回收率是指在測定樣品的同時,于同一樣品的子樣中加入一定量的標準物質進行測定,將其測定結果扣除樣品的測定值,以計算回收率。加標回收設置的注意事項：①同一樣品的子樣取樣體積必須相等;②各類子樣的測定過程必須按相同的操作步...

在進行支原體檢測之前，進行支原體核酸提取的目的是為了從樣品中純化和富集支原體的DNA，以便進行后續(xù)的檢測和分析。以下是進行支原體DNA提取的主要原因和目的：分離支原體DNA：樣品中可能存在多種細菌、***和病毒等其他生物體的DNA。通過提取支原體DNA，...

用qPCR法進行支原體檢測時，出現(xiàn)擴增曲線異常的可能原因是什么？①如出現(xiàn)非特異性擴增現(xiàn)象，該問題是由反應管未蓋緊或密閉性差引起溶液蒸發(fā)而造成。上機前確保管蓋密閉，反應結束后查看八聯(lián)管或96孔板各管液面是否一致。與設備硬件相關，需咨詢硬件供應商解決。②如出現(xiàn)擴增...

基因***產(chǎn)品是近年來國內(nèi)外藥物研發(fā)的熱點，通常由各種病毒或非病毒載體攜帶***基因組成。在病毒載體中，慢病毒載體(LVs)由于其有效的將基因整合進靶細胞基因組、穩(wěn)定的基因表達等特點，被認為是蕞有希望的基因***載體?？紤]到慢病毒對人的病原性及相關的安全...

用qPCR法進行宿主細胞殘留DNA檢測時，出現(xiàn)擴增效率超出標準要求（低于83.3%或高于110%）的原因有哪些？①設計的引物探針不適用：重新分析靶標序列進行設計。②標曲濃度設定太高，超出標曲線性范圍：對范圍進行驗證，選取合適標曲范圍。③人員操作問題，如稀釋錯誤...

在進行支原體檢測之前，進行支原體核酸提取的目的是為了從樣品中純化和富集支原體的DNA，以便進行后續(xù)的檢測和分析。以下是進行支原體DNA提取的主要原因和目的：分離支原體DNA：樣品中可能存在多種細菌、***和病毒等其他生物體的DNA。通過提取支原體DNA，...

qPCR法支原體檢測試劑盒的操作流程包括支原體DNA提取、qPCR試劑配制、qPCR加樣及上機檢測、結果分析四個環(huán)節(jié)。支原體DNA提取包含樣品前處理（離心分離上清等）、樣品裂解液消化、支原體DNA與磁珠結合、一次洗滌、二次洗滌、洗脫；qPCR試劑在配制時需先將...

《中國藥典》2020版已收載三種方法用于外源性宿主細胞殘留DNA檢測，其中較為常用方法的為qPCR技術，該方法不僅可準確定量，且靈敏度較高可達到fg級，很大提高檢測的準確性。但因其需精密和昂貴的qPCR儀、相關檢測試劑盒價格較高，較難在基層及偏遠地區(qū)實施，且其...

CHO宿主細胞殘留DNA檢測常見問題：①檢測靈敏度：qPCR法可以達到非常低的檢測靈敏度，通?？梢詸z測到1個CHO細胞殘留DNA分子。這種高靈敏度可以有效地避免生物制品中CHO細胞殘留DNA對患者的潛在風險。②特異性：qPCR法的特異性非常高，可以準確區(qū)分CH...